不同培养条件对枯草芽胞杆菌BS168-ΔsinR生物膜形成及维生素K2产量的影响

枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)是合成维生素K₂的微生物之一,维生素K₂的合成量又与细菌生物膜有重要关系。其中sinR是生物膜形成环节中的关键调节基因,我们用同源重组的方法构建枯草芽胞杆菌sinR缺失突变体(ΔsinR)菌株,再以BS168-ΔsinR菌株为出发菌株,采用微孔板法-结晶紫染色测定生物膜形成量,核酸定量仪测定胞外蛋白,苯酚硫酸法测定胞外多糖,HPLC测定维生素K₂的生物合成量。比较分析了不同温度、pH、以及不同浓度的金属离子(Mn²⁺、Fe²⁺、Ca²⁺)对枯草芽胞杆菌BS168及BS168-ΔsinR生物膜形成能力以及维生素K₂合成量的影响。结果表明,重组菌BS168-ΔsinR生物膜形成能力和维生素K₂合成能力均优于原始菌BS168,且重组菌在生物膜形成、维生素K₂合成过程中对温度、酸碱性的适应能力也强于原始菌。一定浓度的金属离子可以促进生物膜的形成及维生...     

两阶段转速调控对纳豆芽胞杆菌合成维生素K2的影响

为进一步提高纳豆芽胞杆菌合成维生素K₂的能力,根据前期不同转速对维生素K₂产量影响的结果,在250 mL摇瓶中考察转速0（产量最大）和200 r/min（产量其次）对菌体生长和产物生成的影响。通过分析不同条件下发酵进程曲线与发酵动力学参数,并对不同时间点的发酵液进行稀释涂布和扫描电镜观察菌体形态变化,提出两阶段转速调控策略,并对影响此调控策略的条件（温度、转速、pH和时间）进行正交优化。0 r/min、108 h产量最高,发酵后期菌体形态多为褶皱,200 r/min菌体数量高于0 r/min,菌体在发酵后期破碎较多,少数表面平整;优化后在40 ℃、pH 6.5、0~36 h控制转速220 r/min,36~132 h转速为0 r/min,维生素K₂的产量为（35.60±0.13） mg/L,比优化前（0、200 r/min）分别提高了1.67倍和9.674倍。分阶段调控转速可以有效提高纳豆芽胞杆菌合成维生素K2的能力,对维生素K₂的大规模生产具有重要的指导意义和参考价值。