桑黄-昆布双向发酵菌质化学成分及抗肿瘤活性

该试验利用桑黄对昆布进行双向发酵处理,探究双向发酵后所得菌质有效成分含量变化及对肿瘤细胞增殖抑制作用。分别采用硫酸-蒽酮比色法、福林酚比色法对昆布水提物和桑黄-昆布双向发酵菌质中总糖、总酚的含量进行测定;采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP）柱前衍生化-高效液相色谱法对昆布水提物、桑黄-昆布双向发酵菌质中单糖组成和含量进行分析;采用磺酰罗丹明B（sulforhodamine B,SRB）比色法测定昆布水提物、桑黄-昆布双向发酵菌质对人肺癌细胞A549、人结肠癌细胞HCT-116、人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MCF-7、人宫颈癌细胞HeLa、人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）增殖的影响。结果表明,昆布经桑黄双向发酵后,总糖和总酚含量显著升高;单糖组成中古洛糖醛酸、甘露糖醛酸、甘露糖和岩藻糖含量也显著升高;与昆布水提物相比,100 μg/mL 桑黄-昆布双向发酵菌质对HUVECs 表现出较好的增殖抑制作用（抑制率为49.35%）,对A549、HCT-116、HeLa 细胞也表现出一定的增殖抑制作用,而对HepG2、MCF-7细胞未表现出增殖抑制作用。因此,桑黄-昆布双向发酵后,发酵菌质中总糖、总酚、特征单糖含量明显增加,对肿瘤细胞增殖抑制作用也进一步增强。     

龟甲胶对环磷酰胺引起的贫血大鼠的改善作用研究

目的：研究鱼鳔、驴皮化学成分及对环磷酰胺所致贫血小鼠的改善作用。方法：测定总蛋白含量、氨基酸组成及分子量范围;胃蛋白酶辅助提取获得胶原蛋白,并分析其含量、组成及结构;腹腔注射环磷酰胺（80 mg/kg）建立小鼠贫血模型,灌胃给予受试物（鱼鳔胶1.52 g/（kg·d）、驴皮胶1.39 g/（kg·d））,观察对脏器系数和血液学指标的影响。结果：鱼鳔、驴皮总蛋白含量均大于97%,鱼鳔胶、驴皮胶分子量在50 Da~328 kDa之间;鱼鳔、驴皮胶原蛋白均为Ⅰ型胶原蛋白,鱼鳔胶原蛋白含量约为驴皮的6.51倍,但胶原蛋白三螺旋结构不同,鱼鳔胶原蛋白以α-螺旋结构为主,驴皮胶原蛋白以反平行为主。功效评价结果表明,给药28 d,鱼鳔胶与驴皮胶均可促进环磷酰胺贫血小鼠造血机能的恢复,以鱼鳔胶效果更佳。与模型组相比,鱼鳔胶给药组红细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞、脾脏及胸腺系数均得到显著改善（P<0.05）;驴皮胶给药组红细胞、血红蛋白及胸腺系数显著改善（P<0.05）。结论：对鱼鳔、驴皮化学成分进行系统研究,确定了化学成分间的差异;发现鱼鳔胶、驴皮胶均可促进环磷酰胺贫血小鼠造血机能的恢复,且鱼鳔胶效果更佳,推测二者补血活性可能与氨基酸、胶原蛋白等成分有关。本研究为鱼鳔资源精深加工奠定理论基础。

     

紫贻贝酶解工艺及抗炎活性研究

目的：结合抗炎指标对紫贻贝酶解工艺进行筛选,确定最佳制备工艺。方法：采用脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型评价抗炎作用。以酶解得率和NO抑制率为指标,从菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶和中性蛋白酶6种蛋白酶中筛选出最佳蛋白酶和超滤组分,并通过正交试验优选最佳试验方案。结果：紫贻贝经胰酶酶解得到的分子质量小于5ku的组分抗炎效果最佳。最佳工艺条件为料液比为1:15(w:V)、加酶量为1.5%、酶解时间3 h,在此条件下的酶解得率为13.54%(以鲜品计),NO抑制率为99.17%。结论：紫贻贝酶解物具有明显的抗炎作用,制备工艺合理可行,适合工业化生产。     

响应面法优化龙葵中澳洲茄边碱的提取工艺及其体外抗肿瘤活性研究

利用响应面法优化龙葵中澳洲茄边碱的提取工艺。采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计,以澳洲茄边碱提取率为指标,考察乙醇体积分数、提取时间、料液比等因素对提取效果的影响。确定龙葵中澳洲茄边碱的最优提取工艺为:乙醇体积分数80%、提取时间2.1h、料液比1∶12(g∶mL)、提取2次,在此条件下,澳洲茄边碱提取率为0.721mg·g-1,与理论值(0.712mg·g-1)相符,表明工艺可行,预测性较好。从龙葵中提取的澳洲茄边碱能明显抑制K562、HL-60、BGC-823、MCF-7、Hela等肿瘤细胞的增殖,具有较强的体外抗肿瘤活性。