特基拉芽孢杆菌L-天冬氨酸α-脱羧酶的异源表达及高密度发酵

L-天冬氨酸α-脱羧酶（L-aspartate α-decarboxylase,PanD）能选择性脱去L-天冬氨酸的α-羧基生成β-丙氨酸,具有重要的工业应用价值。以特基拉芽孢杆菌（Bacillus tequilensis）PanD37的基因组为模板,扩增PanD表达基因panD,构建表达质粒pET32a（＋）-panD,转入Escherichia coli BL21（DE3）成功实现异源表达。利用摇床和发酵罐优化培养条件实现高密度发酵,确定最佳培养条件为：37?℃培养8?h,加入终浓度0.5?mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）降温至26?℃诱导,采用葡萄糖为碳源并控制初始质量浓度为5?g/L,发酵过程中采用pH-stat方式补料。在此基础上利用5?L发酵罐进行发酵产酶,酶活力最高可达1?109.8?U/mL,OD600?nm达到106.3。全细胞催化100?g/L?L-天冬氨酸,反应10?h物质的量转化率为99.2%。构建的重组菌经发酵优化后具有较高的细胞浓度和PanD活力,为生物法β-丙氨酸的工业化生产与应用提供理论支持。     

制冷压缩机阀片断裂失效分析

对半封闭活塞式制冷压缩机的断裂阀片的分析表明,阀片失效属于金属疲劳断裂机制。阀片表面缺陷可以形成疲劳裂纹源,而阀片在加工或者使用过程中形成的机械损伤或者腐蚀凹痕是表面缺陷的表现形式。对7C27 Mo2和20C两种阀片钢进行比较分析可知,7C27 Mo2比20C具有更高的抗拉强度、硬度、疲劳强度和耐腐蚀性,在压缩机高负荷使用条件下应优先选用7C27 Mo2。