酒精酵母生物合成1.6-二磷酸果糖的条件优化研究

为优化酒精酵母F15菌株转化合成1,6-二磷酸果糖(FDP)的条件,在单因素试验基础上,采用Box-Benhnken设计响应面中心组合试验,建立FDP生物合成量随反应液初始pH值、葡萄糖浓度和磷酸二氢钠浓度变化的二次回归方程.结果表明:最适的转化条件为初始pH 8、葡萄糖11％、磷酸二氢钠7％,在此转化条件下,获得的最大FDP生物合成量为3.74 g/L.     

表面活性剂与氧载体对地衣芽孢杆菌ZJUEL31410发酵产弹性蛋白酶的影响

为了探究表面活性剂与氧载体对地衣芽孢杆菌ZJUEL31410发酵产弹性蛋白酶的影响,将各种不同浓度的油酸、液体石蜡、乙酸乙酯、吐温80、正十二烷添加至发酵培养基,对发酵过程中弹性蛋白酶活、生物量、还原糖消耗量等指标进行考察,结果发现添加4%吐温80时酶活力最高可达515 U/mL,而其它表面活性剂的效果不如吐温80.本试验中还利用5L发酵罐对吐温80添加时间进行研究,结果表明发酵初始添加吐温80对弹性蛋白酶合成有较好的效果.从细菌微观形态的变化分析得出结论:吐温80可以增强细胞膜的通透性,使溶氧更易进入细胞,从而促进弹性蛋白酶的合成.     

蛋白酶A缺失对啤酒酵母抗逆性能的影响研究

蛋白酶A(PrA)是啤酒酵母体内一种重要的蛋白酶,参与液泡中多种酶的加工和成熟过程.本文主要研究蛋白酶A对酿酒酵母抗逆生理代谢性能抗不良环境的特性.试验结果表明蛋白酶A缺失对啤酒酵母生长性能、低氮耐受能力、抗氧化能力和高酒精度耐受能力均有显著影响.     

黄绿蜜环菌细胞生物转化对羟基苯甲醇的产物分离纯化及结构鉴定研究

采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、制备液相色谱等方法对天麻素生物催化合成体系的转化产物分离纯化,得到两个组分,经质谱和核磁共振结构鉴定为天麻素和对羟基苯甲醇。在试验过程中,对获得的水相体系产物进行重结晶,光谱和半制备液相鉴定,获得一结晶组分,经初步定性鉴定该组分为尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG);同时生物转化体系中还存在另1种糖苷类物质,其具体结构有待鉴定。     

五种野生青海食用菌提取物的抗氧化活性研究

本文综合分析了草原白蘑菇1号Agaricus bisporus(Lange)Sing.、毛头鬼伞Coprinus comatus(Muell.:Fr.)S.F.Gray.、墨汁鬼伞Copinus atramentarius(Bull.)Fr.、长根菇Collybia radi-cata(Relh.ex Fr.)Quel.和翘林丝盖伞Inocybe calamistrata(Fr.)Gill.五种来自青海的野生食用真菌的抗氧化活性及相关成分。翘林丝盖伞的两种提取物均表现出了最强的DPPH自由基清除能力,其甲醇提取物和乙醇提取物的EC50值分别为0.90±0.06 mg/m L和0.85±0.14 mg/m L;长根菇甲醇提取物(0.45±0.01 mg/m L)和乙醇提取物(0.78±0.01mg/m L)展现出了最强的铁离子螯合能力;翘林丝盖伞甲醇提取物(0.26±0.002 mmol Trolox equivalents/g)和55%乙醇提取物(0.24±0.003mmol Trolox equivalents/g)具有最高的Trolox等价摩尔含量。墨汁鬼伞甲醇提取物中抗氧化活性成分-总酚的含量(19.04±0.30 mg gallic acid equivalents/g)显著高于其他四种提取物(P0.05);翘林丝盖伞乙醇提取物的总酚含量(11.41±0.09 mg gallic acid equivalents/g)显著高于其他四种提取物(P0.05)。五种野生食用真菌均具有显著的抗氧化活性,总体上来说,翘林丝盖伞的抗氧化活性更强。     

蛋白酶A敲除对酿酒酵母细胞抗辐射特性的影响

蛋白酶A(PrA)是啤酒酵母体内一种重要的天冬氨酸蛋白酶,由PEP4基因编码。它能够催化细胞内蛋白质水解,参与液泡中多种酶的加工和成熟过程。本文考察了蛋白酶A对酿酒酵母的抗辐射性影响。以正常单倍体酿酒酵母菌株和敲除PEP4基因的突变菌株为研究对象,比较两者抗辐射的特性。试验结果表明:蛋PEP4基因的敲除对啤酒酵母的抗氧化酶,即超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)有显著影响。蛋白酶A的缺失和辐射导致突变株细胞内海藻糖的积累量大幅增加。     

黄绿蜜环菌生物合成的天麻素抗炎及免疫调节活性评价

对黄绿蜜环菌生物合成的天麻素进行抗炎及免疫调节活性探讨.试验结果表明,生物合成的天麻素对小鼠耳廓肿胀和小鼠肉芽肿有明显的抑制作用,抗炎效果很好.在碳廓清试验中,天麻素能够较显著地提高小鼠碳廓清指数和吞噬指数.在小鼠淋巴细胞转化试验中,天麻素促进了淋巴细胞的增殖.对NK细胞影响试验中,天麻素能够明显提高靶细胞的吞噬能力,具有很好的免疫调节作用.     

调控爪哇正青霉生物合成8-异戊烯基柚皮素的关键酶鉴定及性质研究

采用对硝基苯酚法建立爪哇正青霉生物转化合成8-异戊烯基柚皮素体系中O-脱甲基酶酶活的分光光度测定方法;研究生物催化合成8-异戊烯基柚皮素的过程;采用3种经典的细胞色素P450酶抑制剂对P450酶和生物转化反应之间的关系进行鉴定;研究O-脱甲基酶的酶学性质。研究结果表明,生物转化体系中O-脱甲基酶酶活力在第4天达到最大值,其最适反应温度60℃,最适p H 8.0。     

黄绿蜜环菌生物转化合成天麻素体系的葡萄糖基转移酶初步研究

黄绿蜜环菌是药用植物天麻的共生菌。研究发现黄绿蜜环菌能催化对羟基苯甲醇合成天麻素,该过程实际上是对羟基苯甲醇的转糖基反应。本文建立了一种该体系中葡萄糖基转移酶酶活测定方法,并对该葡萄糖基转移酶的最适反应温度、热稳定性、最适pH和酸碱稳定性等酶学性质进行初步研究。研究结果表明该糖基转移酶最适反应温度50℃,在30℃下酶活稳定性最高,最适反应pH6,在pH6～7范围内酶活稳定最好。     

白桦脂醇生产白桦脂酸菌株的低能离子注入选育研究

白桦脂酸具有较宽范围的生物学与药理学活性,本文拟选育能催化白桦脂醇合成白桦脂酸的高产菌株。利用N+离子注入技术对白桦脂酸合成菌——黄绿密环菌(Armillaria luteo-virens Sacc)ZJUQH进行诱变选育,并采用扫描电镜观察出发菌株和突变菌株的微观形态。结果表明,离子注入出发菌获得较高的突变率和较广的突变谱,在注入剂量80×2.6×1013 ions/cm2时正突变率最大。本文筛选出1株遗传性状稳定的白桦脂酸合成菌ZJUQH100-6,催化白桦脂醇底物合成白桦脂酸的得率达到5.34%,相比出发菌提高165.7%。通过扫描电镜观察,出发菌株和突变菌株在微观形态上有明显差异。获得的改良菌株能有效转化白桦脂醇合成白桦脂酸。