固定化酶技术及其载体材料研究

固定化酶技术已经成为酶应用领域中的一个重要研究方向，此技术可以有效地提高酶的催化性能和操作稳定性，为酶在大规模生产中提供有利条件。载体作为固定化酶技术的关键组成部分，其材料的选择对于固定化酶技术的性能至关重要。本文对比了目前载体材料的特点并总结了固定化酶筛选方法，以期为后续固定化酶技术的研究提供基础。     

响应面法优化磁性壳状固定化脂肪酶制备工艺研究

目的 优化磁性壳状脂肪酶固定化工艺,并利用磁性固定化脂肪酶快速筛选荷叶中具有脂肪酶抑制作用的活性成分。方法 采用一锅法制备Fe₃O₄-壳聚糖作为固定化载体,采用响应面设计法优化以聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂的脂肪酶固定化工艺,确定反应pH、温度、加酶量和时间,并进行固定化脂肪酶表征与活性测定;固定化脂肪酶与荷叶样品液反应30 min后,磁分离,甲醇洗脱后采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析。结果 以固载率、酶活、酶活回收率为响应值,确定最佳制备工艺为pH 8.1、反应温度40℃、酶质量浓度2.55 mg/mL、反应时间2.3 h,固载率均值为85%、酶活均值为5.44 U/mg、酶活回收率均值为81%;利用固定化脂肪酶快速筛选发现荷叶中荷叶碱与2-羟基-1-甲氧基阿朴啡具有较高的脂肪酶抑制活性。结论 本研究优选的脂肪酶固定化制备流程简捷,脂肪酶利用率提高,易分离,有助于荷叶等药食两用原料中脂肪酶抑制成分的快速筛选研究。     

HPLC-DPPH法在线分析远志抗氧化活性成分研究

建立了远志抗氧活性成分的在线快速分析方法，为其药效物质筛选研究提供了支持。采用HPLC-DPPH在线分析方法，结合对照品保留值对照与活性测定，确定了活性成分，采用抗氧化阳性样品对照分析了活性成分的抗氧化活性强度。结果表明，远志中，3,6’—二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖酯A6为主要抗氧化活性成分。在线快速分析方法简捷、高效，适用于中药远志的抗氧化活性成分的快速筛选。