白芸豆清蛋白提取工艺及分子组成研究

通过单因素和正交实验优化了白芸豆清蛋白的提取工艺,并对清蛋白的等电点及分子组成进行分析。结果表明:白芸豆清蛋白的等电点为3.5;清蛋白最佳提取条件为:料液比1∶8(g/mL),提取温度55℃,提取时间3h,在此条件下的清蛋白提取率为37.93%;SDS-PAGE电泳分析表明,在10℃和20℃静置的清蛋白提取液含有5条蛋白亚基条带,在4℃静置后的清蛋白提取液只保留了35.31ku和30.52ku这两个蛋白亚基,其中亚基35.31ku为α-淀粉酶抑制剂。     

香菇柄中水溶性蛋白的提取及组成分析

本文研究了在微碱性环境下提取香菇柄水溶性蛋白的最佳工艺,并测定了该蛋白的等电点与分子量。结果表明:香菇柄水溶性蛋白的最佳提取条件为料液比1∶28,提取时间6h,提取温度24℃;此条件下,水溶性蛋白的提取率可以达到香菇柄中总蛋白的52.8%;SDS-PAGE电泳分析表明:在该条件下,得到的水溶性蛋白质分子量较大,且大都集中于40⁵0ku左右;香菇柄中水溶性蛋白的等电点结果为p H4.3,与大多植物蛋白的等电点接近。      

小米谷糠多肽对肝损伤及癌前病变的抑制作用

目的：观察小米谷糠多肽的抗肿瘤和抑制化学性肝损伤作用。方法：分别用菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、537酸性蛋白酶水解小米谷糠,得到3 种多肽;先用噻唑蓝法检测3 种谷糠多肽的体外抗肿瘤作用,然后用抗肿瘤效果最好的多肽喂食经氨基比林-NaNO2诱导的肝损伤小鼠,并作肝组织学观察。结果：当菠萝蛋白酶水解的谷糠多肽质量浓度为50 mg/mL时,S180和H22肿瘤细胞的抑制率可达到56.28%和53.73%,该多肽在10 g/（kg·d）剂量可显著降低小鼠肝脏丙二醛含量和血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性（P＜0.01）,并提高肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性（P＜0.01）。组织切片显示,模型组小鼠肝细胞损伤严重,谷糠多肽高剂量组动物的肝细胞形态基本正常。结论：菠萝蛋白酶水解的谷糠多肽具有抑制肝损伤及癌前期病变的作用。     

沙棘籽酶解多肽的抗氧化性能研究

目的:研究沙棘籽三种蛋白酶水解多肽的抗氧化效果。方法:对三种蛋白酶的水解多肽进行体外清除自由基和总抗氧能力的实验及筛选,选取效果最好的一种进行体内抗氧化实验。结果:在胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶水解沙棘籽得到的多肽中,胃蛋白酶水解的沙棘籽多肽的综合抗氧化结果最佳;动物实验表明,胃蛋白酶水解多肽灌胃的小鼠血液中GSH、CAT等抗氧化指标与阳性组相比差异显著(p<0.05),MDA指标降低效果显著(p<0.05)。结论:胃蛋白酶水解的沙棘多肽与其他两种多肽相比具有更好的抗氧化效果。      

具有α-淀粉酶抑制活性的白芸豆多肽的制备及其热稳定性研究

以白芸豆为原料,酶法制备多肽。以α-淀粉酶抑制率为指标,比较酸性、中性和碱性蛋白酶的酶解效果。结果表明:3.350酸性蛋白酶的酶解效果最好。通过加酶量、酶解p H值、酶解温度和酶解时间的单因素试验和正交试验,得到制备白芸豆多肽的最佳工艺条件为:加酶量3 200 U/g、酶解p H 2.2、酶解温度55℃、酶解时间60 min,此条件下白芸豆多肽α-淀粉酶抑制率为80.82%。热稳定性研究表明,白芸豆多肽的热稳定性高于α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)粗提液,该多肽在85、90℃条件下的α-淀粉酶抑制活性能保持更长时间。凝胶电泳分析表明白芸豆多肽的分子质量为7.53~9.09 ku。     

2 种红芸豆蛋白的提取及组分分析

分析比较了英国大红芸豆和山西小红芸豆主要营养成分和可溶性蛋白含量。并对2 种红芸豆清蛋白提取工艺及功能性质、亚基组成进行了研究。结果表明：大小红芸豆主要营养成分具有显著性差异,可溶性蛋白含量均为清蛋白含量最高,分别为74.08%和66.50%;球蛋白含量分别为10.08%和13.05%;谷蛋白含量分别为7.23%和7.24%;醇溶蛋白含量分别为6.79%和6.12%。2 种红芸豆提取优化结果表明：料液比对大红芸豆清蛋白提取率具有极显著影响（P＜0.01）,对小红芸豆清蛋白提取率具有显著影响（P＜0.05）;提取温度、提取时间只对大红芸豆清蛋白的提取率有显著影响（P＜0.05）。溶解性分析表明：2 种红芸豆的等电点均为pH 4.7。电泳分析表明,英国大红芸豆和山西小红芸豆清蛋白组成在19.0～44.0 kD范围有3 个条带分布基本一致,分别为19、23、43 kD左右,在44.0～97.4 kD的分布不同。     

酶解小黑豆乳清多肽抗肿瘤作用的研究

研究以小黑豆乳清为原料,比较木瓜蛋白酶、537酸性蛋白酶、ProteAX蛋白酶三种蛋白酶水解多肽产物的分子量分布及其对小鼠H22肿瘤细胞生长抑制作用。结果表明,ProteAX酶解多肽的分子量分布明显不同于另外两种多肽,且对小鼠H22肿瘤细胞生长抑制率最高,当ProteAX酶解多肽浓度为40mg/mL时,可达51.36%。用ProteAX酶解多肽喂食用氨基比林-亚硝酸钠（AP-NaNO2）诱导的肝损伤模型小鼠,结果显示,与模型组相比,该多肽可以显著降低肝脏MDA和血清ALT、AST活性（p<0.05）,并提高肝脏GSH-Px活性（p<0.05）。肝脏组织切片结果显示,模型组小鼠大部分肝细胞形态不正常,细胞损伤严重,出现明显的癌前期病变;而小黑豆乳清多肽高剂量组动物的肝细胞形态基本正常,接近正常肝组织;提示ProteAX蛋白酶解多肽可以抑制AP-NaNO2诱导的肝细胞损伤和癌前期病变。