平板显色法同时计数生乳中的大肠菌群和菌落总数

为提高大肠菌群和菌落总数的计数效率，选用2-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷作为平板培养基中的显色底物，利用大肠菌群lacZ基因编码的β-半乳糖苷酶将其分解产生黄色化合物，使得大肠菌群菌落区分于其他菌株，实现大肠菌群和菌落总数的同时计数，优化该培养基配方，评估培养基的特异性、准确性以及在生乳中的应用效果。最终确定该培养基配方：胰蛋白胨12.5 g/L、酵母浸粉2.5 g/L、磷酸氢二钾2.75 g/L、磷酸二氢钾1.75 g/L、氯化钠5.0 g/L、琼脂15.0 g/L，2-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷0.1 g/L，pH值为7.0。在此基础上，添加0.05 g/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷或2.0 g/L乳糖均能够增强菌落显色效果，而葡萄糖则会抑制黄色化合物生成。特异性实验中，仅大肠菌群菌落颜色呈黄橙色，其他菌株则呈乳白色。在生乳样本中，该培养基与国标方法对于大肠菌群和菌落总数的计数结果基本一致。因此，该复合显色培养基能够大大提高大肠菌群和菌落总数的计数效率，降低检测成本，为生乳的卫生指标检测提供一种可行方案。