一株酸性淀粉酶产生菌的分离鉴定及其酶学性质研究

用含有淀粉的选择培养基,通过透明圈法筛选到一株产酸性淀粉酶的菌株,其发酵液酶活力达到123U/mL。通过形态观察。生理生化实验和16S rDNA序列分析等方法初步鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为Bacillus lincheniformis BW-2。对其产生的淀粉酶的酶学性质进行分析发现,该菌株产生的淀粉酶最适反应温度为70℃;最适反应pH为4.5,同时具有较好的热稳定性和pH稳定性;Ca2+和Mg2+对该酶有激活作用,Mn2+和Cu2+对该酶有抑制作用,抑制剂PMSF（苯甲基磺酰氟）及DTT（二硫苏糖醇）对该酶活力影响较小。通过PAGE分析发现BW-2产生的淀粉酶与已知热稳定淀粉酶分子量或结构可能存在差异。Bacillus lincheniformis BW-2是一株具有研究开发潜力的产酸性淀粉酶的菌株。      

黑曲霉VN－19493菊粉酶的酶学性质及应用于果糖生产的研究

对黑曲霉ＶＮ-１９４９３菊粉酶的酶学性质进行了研究,并用该酶水解菊芋,制成果糖含量达８７％的果糖浆。原料低廉、工艺简单,产品风味纯正、口感清爽,极具工业化生产前景。     

一株酸性淀粉酶产生菌的分离鉴定及其酶学性质研究

用含有淀粉的选择培养基,通过透明圈法筛选到一株产酸性淀粉酶的菌株,其发酵液酶活力达到123U/mL。通过形态观察。生理生化实验和16S rDNA序列分析等方法初步鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为Bacillus lincheniformis BW-2。对其产生的淀粉酶的酶学性质进行分析发现,该菌株产生的淀粉酶最适反应温度为70℃;最适反应pH为4.5,同时具有较好的热稳定性和pH稳定性;Ca2+和Mg2+对该酶有激活作用,Mn2+和Cu2+对该酶有抑制作用,抑制剂PMSF(苯甲基磺酰氟)及DTT(二硫苏糖醇)对该酶活力影响较小。通过PAGE分析发现BW-2产生的淀粉酶与已知热稳定淀粉酶分子量或结构可能存在差异。Bacillus lincheniformis BW-2是一株具有研究开发潜力的产酸性淀粉酶的菌株。     

统计学分析方法应用于里氏木霉VDE-3纤维素酶发酵培养基的优化

应用Plackett-Burman设计法对影响纤维素酶液体发酵的培养基组分进行筛选,以纤维素粉、豆饼粉、KH2PO4、（NH4）2SO4、尿素、MgSO4、CaCl2和吐温-80为相关因素分析。确定了影响纤维素酶活力的关键因素为纤维素粉、豆饼粉和（NH4）2SO4。采用响应面法对影响纤维素酶活力的关键因素最佳水平范围进一步研究,并通过二次方程回归求解确定纤维素粉、豆饼粉和（NH4）2SO4的浓度分别为18.18 g/L、10.58 g/L和2.03 g/L时,模型预测的纤维素酶FPA活力为2.23 IU/mL,实验验证结果为2.19 IU/mL,预测值与验证值吻合较好。     

HPLC测定六神曲中青蒿素、芦丁和槲皮素含量

本研究建立了高效液相色谱法测定六神曲中青蒿素、芦丁和槲皮素成分含量的方法。采用AcchromXAquaC18色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm）。测定青蒿素含量时,用柱前衍生方法,以乙腈-水（60∶40）为流动相;流速0.8 mL/min,紫外检测波长为260 nm,柱温35℃。测定芦丁和槲皮素含量时,以甲醇-0.4%磷酸（50∶50）为流动相;紫外检测波长分别为360 nm（芦丁）和280 nm（槲皮素）;流速0.8 mL/min;柱温30℃。结果青蒿素、芦丁和槲皮素可以达到较好的分离。在选定质量浓度范围内线性关系良好（青蒿素R2=0.9991,芦丁R2=0.9994,槲皮素R2=0.9995）,平均回收率分别为98.6%,101.4%和97.2%,相对标准偏差（RSD）分别为1.65%,0.91%和1.46%（n=5）。该方法简便准确,重复性和稳定性较好,为六神曲的质量评价和控制提供了科学依据。     

小体系高通量比色测定糖化酶活力新方法

本研究建立了一种小体系结合96孔板比色测定糖化酶活力的新方法.经实验证明,在96孔板内,波长540nm处,葡萄糖浓度与光密度(OD)值有很好的线性关系,其线性相关系数r值达到0.9996；通过加样回收实验发现,其回收率为98.5％～103.2％,相对标准差为1.8％；通过精密度分析实验发现该方法测量样品的精密度优于国标法及普通DNS法,其测定的结果与现行国家标准测定糖化酶方法所得到的结果差异率小于0.5％.本研究建立的方法不仅准确、可靠,而且实现了小体系、高通量快速比色测定,为糖化酶工业检测及糖化酶生产菌株的高通量筛选奠定了重要方法基础.     

六神曲发酵过程中5种消化酶的动态分析

该文主要通过对六神曲发酵过程中产生的5种消化酶进行了系统而全面的分析,确定了六神曲的最佳成熟时问。研究发现,发酵过程中产生的5种消化酶存在规律性变化：糖化酶活力在发酵第3d时达到高峰,淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶的活力在发酵4d时达到高峰,之后4种酶活力均有所下降并逐渐趋于平稳;蛋白酶活力在发酵前4d变化不大,之后随发酵时间的延长活力显著增加。最终确定六神曲发酵的成熟时间为4d-6d,为六神曲的工艺及质量控制提供依据。消化酶的活力变化可以作为控制六神曲发酵工艺及质量评价的指标。