紫苏籽粕蛋白源抗氧化肽的纯化、结构鉴定及体外抗氧化活性

通过单因素和响应面实验对紫苏籽粕蛋白的闪提工艺进行了优化,将所获蛋白通过碱性蛋白酶酶解,酶解物依次通过超滤和柱层析进行分离纯化,并对抗氧化活性最高的多肽进行液质分析。结果表明,紫苏籽粕蛋白提取的最优工艺参数为：料液比1︰20(g/mL)、闪提pH 10、闪提时间30 s和闪提转速3000 rpm。蛋白酶解物经超滤分离后,其分子量小于3kDa的组分具有较高的抗氧化活性、该组分经DEAE-32离子交换色谱分离后, 得到D1、D2、D3共3个组分,其中D1的抗氧化活性最好,D1经Sephadex G-25凝胶层析分离纯化后,富集得到G1和G2两个组分,组分G1抗氧化活性最高。抗氧化肽G1对DPPH、ABTS、O_2^-、.OH 自由基清除率及还原力依次为98.97%、85.11%、91.83%、93.40%、0.477;通过LC-MS-MS鉴定,抗氧化活性肽G1组分主要由15个氨基酸组成,荷质比m/z为672.39,分子质量为1718.82 Da,其氨基酸序列为Glu－Met－Pro－Tur－lle－Ala－Ser－Met－Gly－lle－Tyr－Val－Val－Ser－Lys。     

紫苏籽粕抗氧化肽的纯化、鉴定及降血脂功效研究

使用碱性蛋白酶对紫苏籽粕蛋白酶解,酶解物依次通过超滤和柱层析进行分离纯化,纯化肽经LC-MS-MS鉴定并通过动物实验对其进行降血脂及抗氧化功能性研究。结果表明,蛋白酶解物经超滤分离后,其分子质量小于3 ku的组分具有较高的抗氧化活性、该组分经DEAE-32离子交换色谱分离后,得到D1、D2、D3共3个组分,其中D3的抗氧化活性最好,D3经Sephadex G-25凝胶层析分离纯化后,富集得到G1、G2、G3三个组分,组分G2抗氧化活性最高。抗氧化活性肽G2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、超氧阴离子■、羟基(·OH)自由基清除率及还原力依次为70.00%、47.09%、51.17%、70.04%、0.742;通过LC-MS-MS鉴定,抗氧化活性肽G2组分由7个氨基酸组成,分子质量为790.375 5 u,其氨基酸序列为Ala-Ala-Asp-Cys-Arg-Ala-Lys。经低、中、高剂量组G2灌胃处理后的小鼠相比高脂模型组,小鼠体内的MDA(丙二醛)含量显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01)...     

小米多糖分离纯化及抗氧化活性研究

以河峪黄小米为原料,通过响应面实验考察料液比、超声时间、提取温度、纤维素酶量对小米多糖提取量的影响,并对小米多糖进行分离纯化和体外抗氧化活性研究。结果表明：超声辅助酶法提取小米多糖的最佳工艺：料液比为1:22（g/mL）,加酶量1%,超声时间21 min,提取温度60 ℃,此时小米多糖提取量为 30.34 mg/g。木瓜蛋白酶法-Sevag法蛋白脱除率为78.23%,多糖保留率为89.42%。用D315树脂法脱色率为88.00%,多糖保留率为80.20%。DEAE-52纤维素色谱柱和Sephadex G-100柱色谱纯化得到多糖组分MP-1。MP-1对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子清除率最高分别为75.33%、70.69%、68.62%,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子半抑制浓度分别为1.105 mg/mL、0.200 mg/mL、1.371 mg/mL,表明小米中多糖具有较好的抗氧化能力。