免疫磁珠富集联合荧光定量PCR快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌O26∶H11

建立肉制品中免疫磁珠富集(IMS)联合实时荧光定量PCR(qPCR)技术快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)O26∶H11的方法。方法 建立针对编码O26抗原wzx基因实时荧光定量PCR方法,并验证其特异性和敏感性;人工污染不同浓度STEC O26∶H11的牛肉馅样品,在增菌不同时间后,将增菌液原液、增菌液经免疫磁珠特异性捕获分离物分别进行qPCR检测及平板分离。结果 qPCR检测O26∶H11可产生特异性荧光信号,而23株其他血清型的大肠埃希菌及7株其他种属细菌均未见荧光信号;本方法对纯培养的检测限为5×10^2cfu/ml。人工染菌试验中,当初始染菌浓度达到或高于3×10^2cfu/25g时,增菌培养6h后IMS捕获物可以检测到荧光信号。培养20h后,初始染菌浓度为3SymboltB@10-1 cfu/25g以上,对增菌液直接检测和IMS捕获物检测都可以检测到荧光信号。初始污染浓度较低时,增菌6h后IMS-qPCR的检测灵敏度高于增菌液直接qPCR检测;IMS捕获物涂布显色培养基分离目标菌检测灵敏度高于增菌液直接涂布;CHROMagar STEC显色培养基分离STEC O26∶H11的检测灵敏度高于山梨醇麦康凯培养基(SMAC)。结论 IMS联合qPCR检测食品中的STEC O26∶H11具有特异性强、敏感度高、快速、易操作等特点,可以提高样品中STEC O26∶H11菌的检出率,适用于牛肉制品中STEC O26∶H11的快速检测。     

补充钙、镁、铁、锌等矿物质对妊娠大鼠及胎仔的影响

目的探讨补充钙、镁、铁、锌等矿物质对妊娠大鼠及胎仔发育的影响。方法适应期结束后将孕鼠按体重随机分组,10只已孕大鼠在孕前1 w~0 d即给予样品作为孕前组,40只已孕大鼠分为孕早期(孕0~11 d)、孕中期(孕12~16d)、孕晚期(孕17 d~分娩)实验组和对照组,实验组分别在不同孕期灌胃营养素补充剂软胶囊内容物溶液,对照组灌服大豆油,灌胃量0.94 mL/(kg·d)。观察胎仔数量、异常胎仔数、胎仔生长指标,并采用火焰原子吸收分光光度法测定孕鼠血清及胎仔组织中钙、镁、铁、锌的含量。结果 (1)孕前组、孕早期组孕鼠孕0~11 d体重增加量高于对照组(P0.05);孕中期组孕鼠总增重量高于其他各组(P0.05)。(2)实验组孕鼠产仔数多于对照组(P0.05);各实验组胎仔的身长均小于对照组(P0.05),尾长、体重、头重差异无统计学意义(P0.05)。(3)孕早期组和孕中期组孕鼠血清铁含量高于对照组(P0.05);孕期各组胎仔组织中钙含量均高于对照组和孕前组(P0.05),孕晚期组胎仔组织中锌含量高于其他各组(P0.05),孕早期组和孕中期组胎仔组织镁含量高于对照组(P0.01,P0.05)。结论孕前和孕期补充矿物质可增加孕鼠增重量并可能提高胎仔组织中钙、铁、锌、镁等矿物质的含量。     

北京市批发市场鸡肉中沙门菌血清型和耐药特征研究

目的 了解北京市批发市场零售鸡肉中沙门菌分离株的血清型分布和耐药性特征。方法 针对2014—2015年北京市丰台区3个大型批发市场零售鸡肉中分离的135株沙门菌,使用Luminex血清分型试剂盒和传统血清凝集方法进行血清学鉴定,按照Enterobase数据库推荐条件进行多位点序列分型,采用药敏鉴定板测定菌株对12类25种抗菌药物的敏感性,使用PCR方法检测10种可移动黏菌素耐药基因（mcr）和3种NDM型碳青霉烯酶基因（blaNDM）的携带情况。结果135株沙门菌共检出6种血清群,D1和B为主要血清群;20种血清型,Enteritidis、Indiana和Thompson为优势血清型,占比分别为50.4%、15.6%和8.1%;21种ST型,血清型与ST型具有较好对应。91.9%的菌株为耐药株,菌株对萘啶酸、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和四环素4种药物耐药率最高,多重耐药菌株占全部菌株的71.1%,最高可对10类18种抗菌药物耐药;对8类及以上药物耐药的17株菌株中,16株为Indiana血清型;不同包装方式、不同季节和不同批发市场来源菌株,高重耐药菌株占比具有一定差别。所有菌株均为mc...     

RapidChek SELECT检测食品中沙门菌方法的评价

目的评价Rapid Chek SELECT方法对食品中沙门菌的检测效果并验证。方法用添加并回收沙门菌标准菌株方法验证Rapid Chek SELECT的检测限,添加非沙门菌标准菌株方法测定其特异性,以国标法为参比,通过检测实际样品,对Rapid Chek SELECT方法进行验证。结果 1Rapid Chek SELECT沙门菌检测试纸条的检测限为1 cfu/25 g(或1 cfu/ml);2与10种非沙门菌无交叉反应特异性;3直接检测食品中沙门菌的最低浓度为106cfu/ml;4对实际样品中沙门菌的检测结果显示,Rapid Chek SELECT方法和国标方法阳性率分别为87.5%(35/40)和85%(34/40),两种方法最终检测结果的符合率为97.5%(39/40),Rapid Chek SELECT方法等同于国标方法。结论与国标方法相比,Rapid Chek SELECT沙门菌检测试剂盒灵敏度高、特异性强、操作简便,有效减少非沙门菌的干扰、省时,适用于食品中沙门菌的快速检测。     

低聚果糖降血脂作用及其机制探讨

目的探讨低聚果糖的降血脂作用和机制。方法体内实验:30只昆明种小鼠随机分为对照组、实验低剂量、高剂量共3组,每组10只。实验组小鼠分别灌胃低聚果糖0.8,2.5 g/kg,对照组灌胃等剂量蒸馏水,一日1次,连续30 d,测定血清和肝组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量。体外实验:测定低聚果糖对高脂血症模型动物血清胆固醇的吸附能力;模拟人体胃和肠道p H环境,取一定量低聚果糖,分别加入猪油、花生油、蛋黄,测定不同p H时低聚果糖吸附甘油三酯和胆固醇的能力。结果体内实验中,实验组小鼠血清TG含量低于对照组(P0.01)。低聚果糖对高脂血症模型动物血清胆固醇的吸附率为46.87%。p H 3.0,p H 7.0时,低聚果糖对猪油的吸附能力较强;p H 7.0时,对花生油和胆固醇的吸附能力较强。结论低聚果糖能降低正常小鼠血清TG含量,并可减少胃肠道对猪油、花生油和胆固醇的吸收,提示低聚果糖是影响脂类吸收、代谢的重要因素。     

2013年中国桶装水铜绿假单胞菌的复核验证及耐药特征分析

目的了解2013年中国21个省市自治区桶装水来源铜绿假单胞菌的鉴定正确率,对我国桶装水来源铜绿假单胞菌的耐药状况进行初步分析。方法采用基于eta2和opr I两对基因的PCR方法对桶装水来源铜绿假单胞菌进行快速复核,使用Vitek GN生化鉴定卡进行生化验证,评价分离菌株的复核正确率和PCR方法的准确度,采用微量肉汤稀释法,对8类12种抗生素的耐药性进行测定。结果两对引物均能对铜绿假单胞菌扩增出预期的目的条带,但eta2具有更高的特异性;抽样进行生化试验结果显示2013年各地上报并运送的菌株复核正确率为100%;两种基因的PCR方法准确度均在95%以上,但均存在较低比例假阴性;2013年中国21个省市自治区上报的531株铜绿假单胞菌耐药率为11.68%(62/531),主要耐受多粘菌素B(5.27%,28/531)、氨曲南(4.14%,22/531)和美罗培南(3.01%,16/531),替卡西林/克拉维酸和替卡西林的中介率分别为43.31%(230/531)和25.42%(135/531)。结论各地上报分离的铜绿假单胞菌的准确性较高,PCR方法可对桶装水来源铜绿假单胞菌进行快速筛选,结合生化鉴定方法可准确鉴定。桶装水来源铜绿假单胞菌的耐药处于较低水平,但替卡西林/克拉维酸和替卡西林某种程度上显示了一定的耐药趋势,需要定期监测,以阐明桶装水中的铜绿假单胞菌的耐药特征和耐药趋势。