合成洋茉莉醛重组菌株的构建与产物鉴定

将一种源于假单胞菌的目的基因克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-22b(+)-tao,并转入到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达。获得的E.coli BL21(DE3)(tao)于37℃培养70~90 min后,加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙荃硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG),20℃诱导6 h,黄素单加氧酶(trans-anethole oxygenase,TAO)酶活可达35 U/g。在pH值为8、反应温度为30℃的条件下,重组菌全细胞转化黄樟油素生成洋茉莉醛的质量浓度可达9.15 g/L。反应液经乙酸乙酯萃取、浓缩及干燥处理后得到产物晶体,红外色谱以及核磁共振分析证实其为洋茉莉醛,高效液相色谱测定其纯度为97%以上。     

枯草芽孢杆菌发酵生产利巴韦林的变温控制策略研究

以枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)TM903为供试菌株,考察了不同的培养温度(34～40℃)对利巴韦林摇瓶发酵的影响。结果发现,38℃条件下菌体生长最好,利巴韦林产量最高,可达4.12g/L。基于上述结果,研究了3种变温控制模式条件下利巴韦林摇瓶发酵过程。得出如下结论:0～24 h发酵温度为38℃,24 h后每6 h提高2℃,并采用这种温度控制方式进行5L自控发酵罐试验,60h后可积累利巴韦林5.86 g/L,比同类研究的产量(4.69 g/L)提高了24.95%。     

混合菌发酵法生产三氮唑核苷的工艺条件优化

以枯草芽孢杆菌（Bacillus substilis）TM903和谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）TL1105为供试菌株,进行混合菌发酵法生产三氮唑核苷的研究。通过对TL1105接种量、KH2PO4、Mn2+以及前体物1H-1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺（简称TCA）添加量的研究初步确定三氮唑核苷的发酵工艺条件。采用MINITAB软件对葡萄糖、KH2PO4、Mn2+及TCA的添加方式进行析因实验设计,得出最佳发酵条件,即一次性投糖,KH2PO4、Mn2+及TCA则进行分批流加。在最佳发酵条件下进行三氮唑核苷混合菌发酵,经过发酵60h,发酵液中可积累4.69g•L-1的三氮唑核苷。