聚乙二醇修饰的蓖麻毒蛋白A链的免疫原性和在小鼠体内急性毒性研究

目的研究单甲氧聚乙二醇(mPEG)与蓖麻毒蛋白A链(RA)偶联后RA免疫原性和毒性的改变。方法从天然蓖麻籽中提取纯化的RA,经与含活性马来酰亚胺基团的mPEG反应偶联,得到纯化的mPEG偶联RA。用蛋白质印迹方法比较RA修饰前后的免疫原性,通过测定半数致死量(LD50)比较RA修饰前后的毒性。结果mPEG偶联RA后免疫原性和毒性均明显下降。偶联前RA链的LD50为2.37 mg.kg-1,经mPEG修饰后RA的LD50为6.15mg.kg-1。结论聚乙二醇能遮蔽RA,降低其免疫原性和毒性。     

重组瑞替普酶对体内诱发形成血栓的快速溶栓作用

目的建立以胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成与角叉菜胶诱发大鼠尾部血栓形成模型,评价重组瑞替普酶(Reteplase)对体内诱发血栓形成的快速溶栓作用,为临床应用提供依据。方法将Reteplase与诱导剂混匀后给小鼠作尾静脉注射,观察给药后5min内小鼠死亡数和15min内小鼠偏瘫恢复数,计算药物对小鼠形成脑血栓的保护率;大鼠足跖皮下注射角叉菜胶使尾部形成血栓后给药,观察血栓平均长度及再通率。结果Reteplase对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓有迅速溶栓、急救效应;对角叉菜胶诱发大鼠尾部混合血栓有显著溶栓作用。结论溶栓作用呈现明显的剂量-效应关系。本文首次报道了Reteplase对体内诱发血栓的溶栓作用。     

常见β受体阻断药对正常小鼠脾细胞抗体形成的影响

目的研究普萘洛尔、美托洛尔、MELE对正常小鼠脾细胞抗体形成的影响。方法随机将64只小鼠分为8组,8只/组。分别口服25.0,12.5mg/kg的普萘洛尔;25.0,12.5mg/kg的美托洛尔,32.0,16.0,8.0mg/kg的MELE,0.5%的羧甲基纤维素钠(CMC)溶液。每日1次,连续7d。末次给药后第3天用SRBC致敏,第5天处死。然后分离脾脏,处理后于413nm处用分光光度法(QHS)测定其溶液的吸光度值。结果高剂量时,普萘洛尔、美托洛尔、MELE均能促进脾淋巴细胞抗体的形成。结论β受体阻断药具有增强体液免疫的作用。     

复方制剂中头孢哌酮与他唑巴坦在犬体内药动学的相互影响

目的考察不同给药剂量的头孢哌酮(CFP)/他唑巴坦(TAZ)复方制剂(简称CFP/TAZ)中CFP与TAZ在犬体内药动学行为及相互影响。方法取Beagle犬4只,单次静脉注射CFP(110mg/kg)、TAZ(56mg/kg)及3种不同剂量(31mg/kg、125mg/kg、500mg/kg)的CFP/TAZ,RP-HPLC测定其血药浓度,拟合药动学曲线及计算药动学主要参数。结果单次静脉注射CFP、TAZ及CFP/TAZ在Beagle犬体内的处置都符合二室模型。单次静脉注射CFP与等剂量CFP/TAZ中CFP的血药浓度方差分析无差异,与3种不同剂量CFP/TAZ的药动学参数(T1/2α、T1/2β、Vc、CLS)比较亦无差异,其代谢皆符合线性代谢关系。单次静脉注射TAZ与等剂量CFP/TAZ中TAZ在Beagle犬体内处置亦符合二室模型,其血药浓度及药动学参数比较皆无明显差异。结论CFP、TAZ及CFP/TAZ中的CFP、TAZ在犬体内药动学行为无相互影响,提示CFP/TAZ具有药动学理论的可行性。     

紫杉醇纳米制剂的药动学、荷瘤小鼠组织分布及系统毒性

目的研究紫杉醇纳米制剂的药动学,荷瘤小鼠的组织分布及系统毒性。方法对紫杉醇纳米制剂与市售紫杉醇注射液进行系统比较研究。结果(1)药动学:相同剂量的紫杉醇纳米制剂与紫杉醇已上市注射液静脉注射自身前后交叉设计,犬血药浓度采用HPLC法测定。PK结果表明,纳米制剂AUC、CL比同剂量注射液低(3.710±0.961vs 6.984±1.694μg.h/ml,9.032±2.051 vs 4.964±1.599ml/h.kg),其它参数比较无明显差异;(2)荷瘤小鼠组织分布:昆明种小鼠腋皮下接种H22肝癌细胞,瘤长至约1g后,随机分为2组(2.5mg/kg、4.0mg/kg),腹腔注射给药。两制剂均对H22肝癌细胞显示出良好的肿瘤治疗效果,且以2.5mg/kg纳米制剂组疗效更优;采用LC-MS/MS方法测定了二制剂在H22肝癌细胞荷瘤小鼠体内的主要组织分布,皆以小鼠胰腺、脾脏、卵巢分布最多,但纳米制剂明显高于注射液,血液分布低于注射液;(3)系统毒性:比格犬30只,♀♂各半,随机分为纳米制剂与注射液各2组(40mg/m2、80mg/m2),1个辅料对照组,单次静脉给药。给药后一般毒性反应症状与程度、血常规、血生化2组比较无明显差异;给药后14d处死动物,大体解剖无肉眼可见改变,脏器系数无明显异常;病理检查发现肝、肺有明显的病理改变,病理改变形式基本一致,但80mg/m2组病变程度明显比40mg/m2组重;40mg/m2给药时纳米制剂引起的病变程度比注射液轻。结论紫杉醇制成纳米制剂后,其体内药动行为发生明显变化,其组织分布快,有靶向趋势;以少于等剂量注射液的给药剂量即可达到相同的肿瘤治疗效果,而所引起的毒副反应明显轻于同剂量的注射液;值得对紫杉醇纳米制剂进行更深入的开发研究。