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大豆中含有丰富的蛋白质和多肽,其中露那辛(Lunasin)是一种重要的功能性多肽。为测定国产大豆中Lunasin的含量,本研究以六种国产大豆为实验材料,采用凝胶电泳法对国产大豆中的Lunasin成分进行分离纯化,得到含有Lunasin的凝胶条带,酶解后利用纳流液相色谱串联轨道阱质谱(Nano LC-Obitrap)平行反应监视法(PRM)分析其中的特异性肽段从而测定Lunasin的含量。测定结果表明:在六种国产大豆中,皖豆35大豆中Lunasin含量最高,为4.66 mg/g;中黄13大豆中含量为2.24 mg/g;中黄75大豆中含量为3.35 mg/g;徐豆14大豆中含量为2.59 mg/g;黔豆7号大豆中含量为2.03 mg/g;黑河43大豆中含量为2.87 mg/g。实验结果表明国产大豆中含有丰富的Lunasin。该方法前处理操作简单,重复性好、结果准确,具有较好的线性关系,此方法可用于大豆中Lunasin的含量的测定及筛选富含Lunasin的大豆品种。 相似文献
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CRIP1(cysteine-rich intestinal protein 1)是含有双锌指结构域的蛋白,在很多肿瘤细胞中高表达,但其在肺癌细胞中的生理学功能尚不明确。本研究应用定量蛋白质组学探究CRIP1过表达对肺癌顺铂耐药细胞(A549/DDP)的影响及作用机制。运用慢病毒载体系统构建了CRIP1过表达的A549/DDP稳转细胞系,利用Western Blotting证实了单克隆细胞系中CRIP1的过表达。发现CRIP1过表达能够加快细胞增殖,增加细胞的耐药性。通过定量蛋白质组学分析,鉴定了CRIP1过表达引起的蛋白质组的变化,并且对上调和下调的蛋白进行聚类分析。结果表明,CRIP1过表达上调了烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)和NAD依赖型氧化还原酶的表达,从而促进细胞的增殖,并且提高了细胞的耐药性。 相似文献
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