包装饮用水中铜绿假单胞菌定性检测方法构建

该研究构建包装饮用水中铜绿假单胞菌定性检测方法并开展应用效果评价。通过低菌浓度接种，选取合适培养条件及增菌基础肉汤，通过单因素试验优化增菌液配方，通过多重比较优化选择分离培养基配方。以GB 8538-2022方法为对照，选取市售包装饮用水加入不同类别、菌量标准菌后，使用臭氧发生器分别通气0、30、60、90 min后，再进行膜过滤富集增菌-选择划线分离-MALDI-TOF MS仪鉴定的定性测试，比较两者的灵敏度、选择性、特异性，并选取不同类别样品进行应用效果测试。该研究构建的定性检测方法第一步增菌选取TSB添加甘露醇4 g/L配方，42 ℃培养6~8 h；第二步选择分离选取CN添加丙酮酸钠0.20 g/L配方，42 ℃培养24~48 h，利用MALDI-TOF MS仪对可疑菌可实现准确、快速、高通量鉴定。该法对铜绿假单胞菌的最低识别限为3 CFU/250 mL，可识别1 000~10 000 CFU/250 mL干扰菌，对不同样品的检测识别效果较现行国标差异显著（x2=25.45，P<0.05），相对现有方法，具有灵敏度高、特异性强、简便安全、高效等技术优势。