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利用PCR方法从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组DNA中扩增内切菊粉酶(endo I)全长基因(1551 bp),经序列分析后将其连接到表达载体p PIC9K上,得到重组表达载体p PIC9K-endo I。重组质粒经Sac I线性化并电转化到毕赤酵母GS115,阳性转化子进行发酵产酶后考察其酶学性质。酶学性质研究表明,重组酶的最适p H和最适温度分别为5和60℃,重组酶在55℃下保温9 h后,重组菊粉内切酶仍残余83.2%的活性,表现出极高的热稳定性,Cu2+、Ag+对重组酶有明显的抑制作用。对内切菊粉酶水解菊粉的过程研究表明,重组内切菊粉酶能在8 h内将4%(w/v)菊粉水解为36个聚合度的低聚果糖,水解11 h后,低聚果糖得率达到63.5%,本研究为进一步开发以菊粉为原料生产低聚果糖的应用奠定了基础。 相似文献
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本试验通过Box-Behnken Design中心组合试验对出发培养基X24进行优化,选取玉米粉、黄豆粉、硫酸铵、葡萄糖4个因素建立模型,对菌株TCCC 21101进行发酵测活并进行验证试验,最终得到优化后的培养基配方,即玉米粉7.88%、黄豆粉2.82%、硫酸铵0.4%、葡萄糖0.6%、硫酸亚铁0.01%、L-乳酸0.2%、碳酸钙0.5%、耐高温α-淀粉酶0.07%和豆油0.05%。该培养基发酵测活得出抑菌圈直径的大小约为19.35 mm,其效价约为4147 U/g,对比工业发酵培养基,该培养基配制简单,成分廉价易得,较适合实验室研究用。 相似文献
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