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将环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)联合应用,建立了一种快速、便捷的布鲁氏杆菌检测方法。针对布鲁氏杆菌OMP25基因设计4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针。生物素标记LAMP扩增产物能够特异性地与FITC标记的探针杂交,杂交产物经LFD检测。优化后的扩增温度和时间为63℃反应50 min,加上样品的前处理,完成检测仅需80 min。LAMP-LFD方法可特异性地检出布鲁氏杆菌,其最低检测限为5.4×100CFU/mL,是利用外引物建立的PCR方法的100倍。试验结果表明,本研究建立的LAMP-LFD方法能够快速、特异地检测布鲁氏杆菌;简单经济,不需要其他辅助仪器,结果即可直观判断;适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值。 相似文献
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万玮樊敏陈云飞江成汉郭恋 《河南建材》2018,(6):48-50
射阳县新城区人民医院地下防水工程采用钢筋混凝土自防水+高分子自粘胶膜防水卷材二道设防做法,高分子自粘胶膜防水卷材采用预铺反粘的施工工艺,从而达到防水卷材与后浇混凝土结构紧密黏结的效果,具备防窜水的明显优势。然而,本工程基础形式为承台+底板,多承台、地梁、坑中坑,给防水施工增加了难度。文章结合工程实际,着重介绍了高分子自粘胶膜防水卷材及预铺反粘技术在承台+底板基础中的应用。 相似文献
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