酶解产物人参皂苷Rh_2、Rh_3的二氯甲烷层析分离

人参皂苷Rh2、Rh3具有一定的抗癌作用,而这些稀有皂苷在传统红参中的含量甚微。为了获得纯度较高的人参皂苷单体,将人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到以人参皂苷Rh2和Rh3为主的混合物。常压下,用二氯甲烷-甲醇作为洗脱液变换梯度进行硅胶柱分离,分别采用流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.10、7∶0.13、7∶0.15、7∶0.18、7∶0.2、7∶0.3渐变梯度进行洗脱,当流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.3时,成功分离出人参皂苷Rh2和Rh3。经高效液相色谱检测,为反式的二十、二十二碳烯Rh3和顺式的二十、二十二碳烯Rh3(即Rk2)混合物,纯度达到95%以上;也得到较纯的Rh2,经高效液相色谱检测为20(S)-Rh2和20(R)-Rh2异构体的混合物,纯度达到85%以上。     

纳豆菌蛋白酶水解玉米醇溶蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽

利用纳豆菌固态发酵产酶酶解玉米醇溶蛋白,酶解物经SephadexG-25分离纯化,对产物及其组分血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性进行检测。结果表明,酶解血管紧张素转化酶的抑制活性为77.83%,经分离后组分3的抑制效果最好,可达89.4%。     

Bacillus natto蛋白酶水解玉米醇溶蛋白抗氧化活性研究

Bacillus natto菌固体发酵产蛋白酶,利用该酶水解玉米蛋白粉,水解产物经Sephadex G-25分离纯化,并采用邻苯三酚自氧化法对其水解物和分离后各组分进行体外抗氧化活性研究。结果表明,水解产物对邻苯三酚的抑制率为79．96％,经分离后的组分3和组分4的抑制率为83．7％和92．2％。     

玉米醇溶蛋白水解酶菌株的筛选

从Aspergillus oryzae3042、Aspergillus oryzaeIF-39、Aspergillus oryzae3800、Aspergillus oryzaeJ-rapid4种霉菌中通过优化培养条件,筛选出产蛋白酶酶活力高的菌株,结果表明,Aspergillus oryzaeIF-39所产蛋白酶酶活力最高。培养条件为麦麸豆粕比1∶1,pH值7.5,水的质量分数50%,温度30℃,培养96 h,接菌量3环。菌种产酶酶活达到220.78 U/mL,玉米醇溶蛋白的水解度达到33.5%。     

Arthrobacter sp.3胞外酶转化人参二醇类皂苷生成Rg_3的反应条件

人参稀有皂苷Rg3是具有较高抗癌活性的人参皂苷单体,但在人参中的含量极低。采用新筛选的细菌Arthrobacter sp.3产胞外酶转化人参二醇类皂苷(PPD)生成人参皂苷Rg3,为大量制备人参皂苷Rg3提供了方法。实验结果表明,该细菌产生的人参皂苷酶为胞外酶,通过薄层层析法(TLC)分析得到,最佳发酵诱导物为0.1 mg/mL的PPD,最适反应条件为反应温度40℃、反应时间24 h、底物质量浓度0.1 mg/mL。经HPLC检测,在此条件下反应,产物中Rg3的质量分数为21%。     

酶解产物人参皂苷Rh2、Rh3的二氯甲烷层析分离

人参皂苷Rh2、Rh3具有一定的抗癌作用,而这些稀有皂苷在传统红参中的含量甚微.为了获得纯度较高的人参皂苷单体,将人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到以人参皂苷Rh2和Rh3为主的混合物.常压下,用二氯甲烷-甲醇作为洗脱液变换梯度进行硅胶柱分离,分别采用流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)= 7∶0.10、7∶0.13、7∶0.15、7∶0.18、7∶0.2、7∶0.3渐变梯度进行洗脱,当流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.3时,成功分离出人参皂苷Rh2和Rh3.经高效液相色谱检测,为反式的二十、二十二碳烯Rh3和顺式的二十、二十二碳烯Rh3(即Rk2)混合物,纯度达到95%以上;也得到较纯的Rh2,经高效液相色谱检测为20(S)-Rh2和20(R)-Rh2异构体的混合物,纯度达到85%以上.     

玉米醇溶蛋白水解酶菌株的筛选

从Aspergillus oryzae 3042、Aspergillus oryzae IF-39、Aspergillus oryzae 3800、Aspergillus oryzae J-rapid 4种霉菌中通过优化培养条件,筛选出产蛋白酶酶活力高的菌株,结果表明,Aspergillus oryzae IF-39所产蛋白酶酶活力最高.培养条件为麦麸豆粕比1∶1,pH值7.5,水的质量分数50%,温度30 ℃,培养96 h,接菌量3环.菌种产酶酶活达到220.78 U/mL,玉米醇溶蛋白的水解度达到33.5%.     

Arthrobacter sp.3胞外酶转化人参二醇类皂苷生成Rg3的反应条件

人参稀有皂苷Rg3是具有较高抗癌活性的人参皂苷单体,但在人参中的含量极低.采用新筛选的细菌Arthrobacter sp.3产胞外酶转化人参二醇类皂苷(PPD)生成人参皂苷Rg3,为大量制备人参皂苷Rg3提供了方法.实验结果表明,该细菌产生的人参皂苷酶为胞外酶,通过薄层层析法(TLC)分析得到,最佳发酵诱导物为0.1 mg/mL的PPD,最适反应条件为反应温度40 ℃、反应时间24 h、底物质量浓度0.1 mg/mL.经HPLC检测,在此条件下反应,产物中Rg3的质量分数为21%.     

适用于发酵生产过程的谷氨酸微生物传感器的研制

采用夹层法将内含L-谷氨酸脱羧酶的大肠杆菌固定于聚脂(PET)膜与硅橡胶膜之间,并将此与CO_2电极复合构成L-谷氨酸微生物传感器。电极响应时间为3分钟,电极电位mv值与谷氨酸浓度对数的关系曲线在50～6000mg/L成线性关系。传感器的最低检测限为10mg/L,使用寿命可达两周以上。该电极的贮存性能良好,4℃贮存近两个月,未见其响应值下降。电极对浓度为800mg/L试样重复测定11次,其变异系数为0.13％。     

纳豆菌蛋白酶水解玉米醇溶蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽

利用纳豆菌固态发酵产酶酶解玉米醇溶蛋白,酶解物经Sephadex G-259离纯化,对产物及其组分血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性进行检测.结果表明,酶解血管紧张素转化酶的抑制活性为77.83%,经分离后组分3的抑制效果最好,可达89.4%.