平湖BA6S井复杂情况原因分析与认识

平湖BA6S井为自BA6井φ339.7 mm套管开窗的一口侧钻井,该井主要目的是气藏挖潜及兼探放二断块P8以下低孔低渗储层,在钻井施工过程中发生了18次钻具刺漏和一次溢流,文章从井眼轨迹、侧钻方案、钻具疲劳、临界转速及低孔低渗储层溢流预测等方面对该井复杂情况行了分析,并提出建议,对今后类似井的钻井设计和现场作业提供参考。     

随钻地质导向技术在PY断块气田MFS18.5-2均质储层中的应用

针对PY气田构造特征复杂,MFS18.5-2砂岩储层厚度大、均质和疏松等特点,在水平开发井地质导向过程中,运用斯伦贝谢公司随钻测井工具(ADN和GVR)和旋转导向工具(Powerdrive X5)提供的实时自然伽马、侧向电阻率及其成像、密度和中子孔隙度测量资料以及与之适配的地质导向技术,在钻井、地质、测井及录井等多部门通力协作基础上,高效地实现了水平井的钻井目标,保证了储层钻遇率以及预期的产能,同时也丰富了地质导向技术的应用经验。通过实例介绍了12.25in着陆段地质导向技术及8.5in水平段地质导向技术。     

丝状支原体丝状亚种SC型LppQ N-端基因表达与免疫原性

目的构建丝状支原体丝状亚种SC型LppQN端基因表达载体,并进行表达产物的纯化及免疫原性检测。方法利用PCR方法在体外定点突变丝状支原体丝状亚种SC型HVRIX株编码色氨酸的基因(TGA突变为TGG),构建表达载体,使其能在大肠杆菌中大量表达,并对表达产物进行纯化和免疫原性检测。结果表达产物约占菌体总蛋白的53.7%,经Westernblot和ELISA检测,表达蛋白具有良好的免疫原性。结论已成功表达了具有免疫原性的LppQ重组表达蛋白,可以作为诊断抗原用于血清学检测。     

胞内分枝杆菌HSP 70基因的克隆、分析及原核表达

胞内分枝杆菌为致病性非结核分枝杆菌（NTM）之一,分布广泛,人畜均可感染,对人畜健康造成极大威胁。应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HSP 70基因,利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。构建原核表达载体p ET15b-HSP 70,同时进行诱导表达。结果显示,胞内分枝杆菌HSP 70基因完整,ORF基因全长1860bp,共编码619个氨基酸,HSP 70为酸性、亲水性蛋白质,不存在明显跨膜结构,含14个潜在磷酸化位点,亚细胞定位主要存在于细胞质中,无信号肽结构。二级结构预测,蛋白空间结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。同时,以同源建模法预测了HSP 70基因编码蛋白的三维立体结构。成功构建p ET 15b-HSP 70原核表达载体,在原核表达系统中该载体可诱导表达70ku的HSP70重组蛋白。     

榆耳发酵培养基及发酵条件的优化

系统考察了培养基成分及发酵条件对榆耳JX2010菌株液体发酵生物量和发酵液抑菌活性的影响.培养基单因素筛选试验结果表明,玉米淀粉和黄豆粉为最适碳源和氮源;采用均匀设计法对培养基组成优化结果表明,最佳的培养基配方为4.6％玉米淀粉、1.6％黄豆粉、0.03％硫酸镁、0.03％磷酸二氢钾、0.01％磷酸氢二钾、0.001％硫酸锌、0.001％硫酸锰及0.1g/L维生素B1;以此优化的培养基对培养条件研究的结果表明,在10％接种量、20％摇瓶装液量、培养基初始pH5.5的条件下发酵培养时间7d时,发酵效果最好,发酵生物量达到(14.98±0.74) g/L,抑菌直径达到(16.7±0.5)mm.     

抗菌肽Taponicin Ⅱ基因真核表达载体的构建

采用SOE法人工设计和合成抗菌肽Japonicin Ⅱ基因.按正确的阅读框架定向克隆至真核表达载体pPICZαA上,经PCR鉴定及序列分析,所转化的毕赤酵母GS115中含有插入Japonicin Ⅱ基因的重组质粒pPICZαA-Jap,结果表明成功构建了抗菌肽JaponicinⅡ基因真核表达载体pPICZαA-Jap.     

番禺地区防漏与堵漏技术

番禺地区在珠江坳陷的低隆起构造带上,断层发育,破碎带多,从已钻探井和开发井实践经验来看,从浅部到深部都有不同程度渗漏和井漏的现象。通过室内研究分析,针对水基钻井液和油基钻井液不同情况,对钻井工艺及钻完井液封堵性能进行了优化,基本解决了该地区防漏和堵漏问题。     

抗菌肽Japonicin II基因真核表达载体的构建

采用SOE法人工设计和合成抗菌肽Japonicin II基因。按正确的阅读框架定向克隆至真核表达载体pPICZαA上,经PCR鉴定及序列分析,所转化的毕赤酵母GS115中含有插入Japonicin II基因的重组质粒pPICZαA-Jap,结果表明成功构建了抗菌肽JaponicinII基因真核表达载体pPICZαA-Jap。     

细菌基因敲除策略及其在维氏气单胞菌研究中的应用

基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的一种分子生物学技术,目前已广泛应用于微生物基因功能等相关领域的研究中。维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)是气单胞菌科气单胞菌属的一种,近年来,该菌引发疾病的报道逐年增多,因此,对其致病机制的研究显得尤为重要。本文对细菌不同基因敲除策略及其在A. veronii基因功能研究中的应用作一综述,旨在为A. veronii致病机制的深入研究提供参考。     

榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响

为了探讨榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响,用1、5和20mg/d的发酵液多糖饲喂小鼠后,测定了脾脏指数、血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值.结果表明,与水对照组相比,低、中、高三个剂量对脾脏指数均无影响;低剂量组可显著提高巨噬细胞吞噬率(p ＜0.01)和T淋巴细胞转化率(p＜0.05);中、高剂量组对血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值等四项免疫指标有显著(p＜0.05)或极显著(p＜0.01)增高.说明榆耳发酵上清液多糖对小鼠具有良好的免疫增强功效.