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利用酶解结合水溶醇沉提取水溶性的苦瓜多糖(Momordica charantia polysaccharide,MCP),经Sevag法除蛋白、DEAE-纤维素离子交换、Sephadex G-100凝胶过滤获得活性多糖MCPⅡa。由高效凝胶渗透色谱检测可知MCPⅡa为均一多糖,平均分子质量为13.0 kD,单糖组分分析显示其单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖和阿拉伯糖(各组分物质的量比为12∶3.05∶19.89∶5.95∶56)。傅里叶红外光谱、核磁共振及刚果红实验发现其存在C1、C2、C3、C5连接,在水溶液中具有稳定的β-三股螺旋构象,扫描电镜下显示其为菱形晶体颗粒。 相似文献
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产耐热纤维素酶菌株的分子鉴定及产酶条件优化 总被引:2,自引:0,他引:2
从温泉热源地区采集的水样中筛选出1株60℃生长的纤维素酶产生菌NR615。通过ITS序列及系统发育进化树的分析表明该菌株为烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。该菌株在28~60℃生长较好。对菌体及产酶条件进行优化得出:初始pH6.5,碳、氮源分别为结晶纤维素、牛肉膏时有利于产酶。其产生的纤维素酶的最适反应温度65℃,最适pH5.0,且在50~70℃有一定稳定的活性。经过响应面分析优化培养基,发酵5 d时活力达到2.411 3 IU/mL。这些特征表明,该菌株是1株性能良好的耐热纤维素酶生产菌株。 相似文献
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绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)基因克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
绿色木霉Sn-9106是一株分解纤维素能力较强、能利用秸秆固体发酵生产纤维素酶的工业菌株.通常丝状真菌纤维素酶合成受纤维素、槐二糖等的诱导.本研究利用秸秆粉诱导绿色木霉Sn-9106纤维素酶基因,在诱导3.5d时,纤维素酶组分之一——葡聚糖内切酶Ⅰ的mRNA转录达到峰值,收集菌丝提取总RNA,以单链cDNA为模板,PCR扩增获得编码葡聚糖内切酶Ⅰ基因(egl1),去除信号肽序列后构建重组质粒PET-egl1,实现其在大肠杆菌中的表达,所得重组葡聚糖内切酶经组氨酸标签亲和层析纯化得到单一的E-GI蛋白,SDS-PAGE检测为49ku,活力为2.37U/mL. 相似文献
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采用DEAE-52及葡聚糖凝胶G-100柱层析获得了具有抗氧化活性的苦瓜多糖(MCP)组分,通过构建小鼠四氯化碳肝损伤模型探讨了苦瓜多糖对肝损伤的防护作用。研究结果表明,纯化后的苦瓜多糖对超氧阴离子自由基清除率达82%,并能使肝损伤小鼠血清中的ALT和AST活性下降幅度分别达到10.6%及30.7%,肝匀浆中SOD、GSH-PX活性上升幅度分别为33.33%和26.62%,MDA含量则下降了25.62%。提示苦瓜多糖对肝损伤具有一定防护作用,保肝活性与海王金樽相近。 相似文献
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