迷迭香添加鱼肉蛋白可食膜的制备与特性

以鲢鱼肉为主要原料制备蛋白可食膜,测定了迷迭香抗氧化剂添加对膜理化性质和抗氧化性能的影响。结果表明,利用鲢鱼肉可以制备成无色透明的蛋白可食膜,鱼肉蛋白膜的机械性质和水蒸气透过性（WVP）主要由肌原纤维蛋白含量决定,在鱼种间的差异并不显著。添加迷迭香抗氧化剂对鱼肉蛋白膜的机械性质和WVP影响不显著,但对膜的阻隔紫外线能力和抗氧化性能有提高作用。将蛋白膜包装的鳗鱼肉在37℃下放置12h,与未包装样品相比,鳗鱼肉的POV和TBARS的增加明显得到抑制,而添加迷迭香会进一步提高其抑制效果。     

拟穴青蟹新型过敏原肌质钙结合蛋白的纯化、鉴定及分子克隆

为进一步认识蟹类的过敏原,采用免疫印迹方法,分析发现甲壳类过敏患者血清能与拟穴青蟹肌浆蛋白中分子质量约为21 kD的蛋白质产生特异的IgE结合反应,结果显示该蛋白可能是蟹类新型过敏原。通过硫酸铵盐析、阴离子交换和凝胶过滤柱层析等方法对21 kD-蛋白进行分离纯化,采用Western blotting和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）确认纯化的21 kD-蛋白为肌质钙结合蛋白（sarcoplasmic calcium binding protein,SCP）。采用SMART-RACE（SwitchingMechanism At RNA Termini-Rapid Amplification of cDNA Ends）的方法获得SCP的cDNA序列,该序列全长986 bp,开放阅读框为579 bp,编码193 个氨基酸,其理论分子质量21.94 kD,等电点4.44。拟穴青蟹SCP与甲壳类动物SCP具有较高的同源性,与昆虫SCP的同源性较差;三级结构模拟分析显示,SCP含有5 个螺旋-转角-螺旋结构区,即EF-手型结构区,并在其中两个手型结构区形成2 个钙离子结合位点;进一步预测得到SCP的4 个线性抗原表位和3 个构象性抗原表位。     

克氏原螯虾新型过敏原血蓝蛋白的鉴定及性质研究

以克氏原螯虾为研究对象,鉴定血蓝蛋白的理化性质及其过敏原性。酶联免疫吸附试验结果表明:6份甲壳类过敏患者血清与克氏原螯虾血淋巴发生特异性IgE反应,利用离心和柱层析方法从血淋巴中分离纯化到目的蛋白。SDS-PAGE分析显示纯化的目的蛋白由6个亚基(依次为68,72,76,82,84和88 ku)组成,采用兔抗凡纳滨对虾血蓝蛋白多克隆抗体的免疫印迹试验证实目的蛋白为血蓝蛋白。免疫印迹试验结果显示,纯化的血蓝蛋白与甲壳类过敏患者血清出现了特异的杂交显色条带,表明血蓝蛋白具有IgE结合活性。与克氏原螯虾主要过敏原(原肌球蛋白)相比,血蓝蛋白的糖含量为1.99%,热稳定性好,pH稳定性及对胃蛋白酶的耐受性不如原肌球蛋白,但比原肌球蛋白更耐胰液消化。综合血清学及理化性质分析结果,提示血蓝蛋白是克氏原螯虾的1种新型过敏原。