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前期杂交优化后赤芝菌种经液体深层发酵后,提取灵芝菌丝体多糖,并过DEAE-Sepharose Fast Flow柱分离纯化,利用高效体积排阻色谱(HPSEC)检测多糖级分的纯度,采用完全酸水解PMP柱前衍生化RP—HPLC测定多糖级分的单糖组成,多角度光散射仪联用装置(SEC—MALLS)测定其绝对重均分子量(Mw),并且根据分子旋转半径与分子摩尔数的关系曲线斜率初步推断其空间构象。结果显示:分离纯化得到3个多糖级分GLMP1、GLMP2和GLMP3,HPSEC检测其峰面积百分比分别为93.58%,97.64%,99.19%,单糖组成分析结果表明GLMP1、GLMP2和GLMP3均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,但单糖摩尔比各异。SEC—MALLS测试GLMP1、GLMP2和GLMP3的Mw分别为4.526×105,4.603×104,3.760×103 g/mol,3个多糖级分构象可能均为高度紧缩且具有分支结构的聚合物。 相似文献
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HPLC测定牛奶和虾仁中氯霉素残留 总被引:5,自引:0,他引:5
建立了一种检测虾仁和牛奶中氯霉素残留的高效液相色谱(紫外检测,即LC/UV)方法和液相色谱—电喷雾电离质谱联用(LC/ESI—MS)检测方法。色谱分离选用Symmetry C18柱,以乙腈—水为流动相,紫外检测波长为278nm,质谱采用选择性离子检测(M/Z321.0,[M—H]^-)。样品制备省去传统的多次液—液萃取过程,采用有机溶剂直接提取,转溶后,用固相萃取方法净化样品,虾仁和牛奶样品的平均回收率分别为93.7%和96.0%;检测限:LC/UV为2.5μg/kg和8.3μg/kg;LC/ESI—MS为1.3μg/kg和4.5μg/kg。方法准确灵敏,样品预处理较简便快速。 相似文献
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固相萃取-高效液相色谱法测定猪肝中的大环内酯类抗生素 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了猪肝中大环内酯类抗生素螺旋霉素(SPI)、北里霉素(KIT)、替米卡星(TILM)和泰乐菌素(TYL)的高效液相色谱(二极管阵列检测器)检测方法。样品经甲醇提取,Bond Elut SCX固相萃取柱(500 mg,3 mL)净化,液相色谱分析采用Waters Atlantis~(TM)dC_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.025 mol/L磷酸缓冲液-乙腈(pH 2.5)梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。方法的检出限为0.01~0.037μg/mL,在0.2~20μg/ mL范围内峰面积与质量浓度成良好线性关系,相关系数大于0.998。在2、0.5、0.2μg/mL 3个添加水平下,回收率范围为69.2%~93.2%,精密度<12。方法灵敏,实用性强。 相似文献
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为进一步开发利用恩施堇叶碎米荠,通过比较测定3种碎米荠提取物:碎米荠碱提物(CE)、碎米荠富硒蛋白(SPR)和碎米荠富硒多肽(SPI)对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)、2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS+·)和超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除能力,考察3种富硒碎米荠提取物的体外抗氧化性能,并与富硒酵母(SY)、无机硒(IS)和非富硒多肽与无机硒混合物(SPIS)进行比较。结果表明:SPI清除4种自由基能力最强,其对DPPH·、OH·、ABTS~+·和O_2~-·的清除率分别为87.5%,50.3%,99.7%,45.7%,IS清除4种自由基能力最弱,均不超过14%。通过比较SPR、SPI、CE、SY、IS和SPIS对4种自由基的清除率及半抑制浓度(IC_(50)),发现有机硒清除自由基的能力强于无机硒。 相似文献
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以油菜蜂花粉为原料,研究酶法破壁提取蛋白的效果,并对蜂花粉蛋白进行纯化和表征。先对蜂花粉蛋白的提取条件进行单因素及响应面优化,以蛋白提取率为指标,确定最佳提取条件为:将2.5g峰花粉和50 mL pH 5.96的水溶液混合后,加入体积分数0.4%的复合植物水解酶(100FBG/g),42℃振荡酶解6.5h,该条件下蛋白提取率为79.53%。蜂花粉提取液经Sephadex G-100凝胶柱分离后共得到4个组分,经测定其中仅一个组分中含有蛋白质,含量为66.77g/100g;疏水性氨基酸含量为27.52g/100g,氨基酸组成分析和红外光谱结果都表明蜂花粉蛋白中存在芳香族氨基酸;圆二色谱结果表明蜂花粉蛋白易被酶解。 相似文献
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以恩施堇叶碎米荠为原料,研究碎米荠硒蛋白的提取工艺,探讨碎米荠蛋白的抗氧化活性,结果表明:提取温度为50℃,料液质量体积比为1 g:40 mL,先后用去离子水和0.1 mol/L的NaOH溶液分别提取8 h。在此工艺条件下蛋白质得率最高,为75.4%,其中水提蛋白质质量分数为26.5%,硒质量分数为1 748μg/g;碱提蛋白质质量分数为52.3%,硒质量分数为1 513μg/g。碎米荠碱提蛋白经Sephadex G-100凝胶层析柱分离得到两个组分,分别为峰1和峰2,硒质量分数分别为668μg/g和650μg/g,通过研究碎米荠蛋白对羟自由基(·OH)和1-1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)的清除能力,发现碎米荠蛋白均有一定的清除自由基的能力。 相似文献
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