龙井茶树多酚氧化酶蛋白提取方法的优化

目的优化缓冲液匀浆提取茶树多酚氧化酶的方法。方法以龙井43号茶树鲜叶为材料,采用缓冲液匀浆浸提法提取茶树多酚氧化酶,分别进行不同单因素浸提优化试验,测定比较提取的粗酶活性,确定适合的浸提条件。结果以鲜叶标准为一芽二叶,料液比1:2,加入内含5%PVP(w:v)、经预冷的p H5.6柠檬酸-磷酸盐缓冲液(0.15 mol/L),海砂适量,冰浴研磨,4℃条件下隔夜浸提12 h,于4℃、9000 r/min离心35 min,取上清液,为龙井43号鲜叶中多酚氧化酶缓冲液成浆浸提的最优条件。结论采用优化的浸提条件,可以制备得到高活性多酚氧化酶粗酶液,为茶树多酚氧化酶同工酶分离与酶性质研究提供了基础。