肠炎沙门氏菌rpoH 基因缺陷株的构建及其热激响应特性

构建肠炎沙门氏菌Salmonella enteritidis IFO3313 株的rpoH 基因缺陷株IFO3313- ΔrpoH,比较不同温度下缺陷株与野生株的热激响应特性。利用λ-Red 重组系统对Salmonella enteritidis IFO3313 的rpoH 基因进行缺失突变,并使用PCR方法对其进行验证,在此基础上使用不同培养基对缺陷株与野生株进行不同温度下的热激应答结果和亚致死热损伤修复能力的考察：野生株比缺陷株有更强的热激耐受能力,在DHL 平板上对亚致死热损伤的肠炎沙门氏菌的分离检测可能具有假阴性,野生株比缺陷株在TSYA 平板上有更强的修复能力。利用λ-Red 重组系统敲除了肠炎沙门氏菌rpoH 基因,有助于了解肠炎沙门氏菌的热激亚致死及其修复机制,对亚致死状态食源性病原微生物的检测做出初步研究。     

黑曲霉酸性α-淀粉酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

以黑曲霉Aspergillus niger基因组DNA为模板,PCR扩增出酸性α-淀粉酶的结构基因,将此基因插入载体pPIC9K,重组质粒pPIC9K-asAA转化毕赤酵母SMD1168,并通过G418平板培养基筛选高拷贝转化子。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,酸性α-淀粉酶大量表达并分泌到胞外,该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导,摇瓶培养中,2%甲醇诱导培养168h后酶活力达到最大值2838U/mL。SDS-PAGE结果显示该重组酶的分子质量为58kD。该酶的最适反应pH值为4.0,在pH3.0～6.0之间酶活力基本保持稳定,最适反应温度为70℃,在工业生产常用温度50℃条件下,该酶能够长时间保持稳定,并具有较高的酶活力。重组毕赤酵母遗传稳定性良好。     

紫外-微波复合诱变选育高产酿酒酵母菌株

微波是一种高频电磁波，人们在微生物遗传育种的研究中，逐渐认识到微波作为一种物理诱变剂具有显著的成效，本试验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae）31206 作为出发菌株，通过紫外线照射、微波辐照复合诱变选育出一株高产酿酒酵母菌株Y-9-3，产酒精度达18.0%，经8 次传代发酵培养表明其具有较好地遗传稳定性。     

代可可脂花生夹心糖制作工艺优化

以花生糖为糖芯,代可可脂为主要包衣材料,制作代可可脂巧克力花生夹心糖。利用响应面分析法优化糖芯制作工艺。根据Box-Behnken中心组合试验设计原理对工艺条件进行优化,在分析各因素显著性及其交互作用的基础上,得出花生糖芯口感最佳配方为：糖芯的最佳配料为白糖-淀粉糖浆-花生粉末-猪油(添加量质量配比为3.33:4.02:7.24:1),包衣材料的最佳配料为白糖30%、乳化剂0.5%、代可可脂-可可粉8:1(m/m);包衣厚度1.4mm,包衣温度50℃。