氮源对裂褶菌产裂褶多糖和β-1,3-葡聚糖酶的影响

本论文初步探讨了利用裂褶菌发酵体系所产的内切β-1,3-葡聚糖酶对发酵产生的裂褶多糖进行适度酶解,以获得分子量适中溶解度较好的裂褶多糖的可能性。以裂褶多糖产量和β-1,3-葡聚糖内切酶和总酶活为考察指标,采用刚果红琼脂染色法和摇瓶培养,从四株裂褶菌GIM5.42、GIM5.43、GIM5.44、Sc1中筛选出多糖产量和酶活都相对较高的菌株GIM5.43,多糖产量和酶活分别为2.29g/L与0.28 U/m L。在摇瓶中考察了氮源及其添加方式对裂褶菌菌体生长、裂褶多糖产率、β-1,3-葡聚糖酶的酶活及其影响规律。结果表明:菌体生长及其分泌胞外多糖和葡聚糖酶的最适酵母浸膏和氯化铵的添加时间和添加量是不同的。为了保证多糖产率,采用分批补加策略,初始酵母浸膏浓度1.00 g/L,发酵第6 d补加0.10 g/L酵母浸膏,多糖产量为4.16 g/L,比未优化提高了61.24%,总酶活为0.34 U/m L,提高了142.86%。     

正红菇子实体多糖HAP-Ⅰ的结构和抗氧化活性评价

以正红菇子实体分离纯化后得到的单一多糖HAP-Ⅰ为研究对象,用高效凝胶渗透色谱(GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用FT-IR、GC、高碘酸氧化和Smith降解、NMR研究HAP-I分子内部结构;通过体外抗氧化法清除自由基DPPH、O2-、OH以及还原力测定,评价HAP-I抗氧化能力。结果表明,HAP-Ⅰ重均相对分子量MW 16860 u;FT-IR显示HAP-Ⅰ具有多糖的特征吸收峰且为含氨基的β型D-葡萄糖环构型;GC结果显示HAP-Ⅰ含鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖4种单糖,摩尔比为1:8.29:7.45:18.13;高碘酸氧化和Smith降解结果表明,HAP-I是含有甘露糖苷的D-吡喃葡萄糖环,包括α构型和β构型,不含有1→4糖苷键,由66.7%1→3糖苷键,22.24%的1→6、1→糖残基和11.06%1→2糖残基组成;NMR表明HAP-I是含有半乳糖基的吡喃糖,既有α构型,也有β构型;体外抗氧化结果表明,HAP-I有较强的清除自由基DPPH、O2-、OH作用和还原能力。     

正红菇多糖的抗癌和免疫调节活性研究

本文选用人宫颈鳞癌细胞SiHa进行体外抗肿瘤活性试验,并通过划痕实验对其抗肿瘤活性进行验证;同时选用昆明小鼠脾脏细胞的体外增殖试验和小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红以及刺激巨噬细胞产生NO和IL-6的试验,探讨正红菇子实体多糖(HAP-I)的抗癌和免调节疫活性。结果显示,正红菇多糖在125~2000μg/mL的范围内对SiHa细胞的增殖抑制作用随着浓度的增大而增大,并有一定的剂量依赖性;通过癌细胞划痕实验,证实其对癌细胞SiHa增殖有抑制作用。多糖浓度在10~500μg/mL范围内能够促进淋巴细胞的增殖,且能协同LPS和ConA显著促进淋巴细胞的增殖,HAP-I协同LPS在50μg/mL和100μg/mL浓度时增殖作用显著(p0.05),HAP-I协同ConA在100μg/mL浓度时协同效果最佳。HAP-I能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,并且促进巨噬细胞分泌NO和IL-6,表明正红菇多糖有较好的免疫活性。     

不同品种番薯抗氧化活性的对比及热加工稳定性

为比较几种典型番薯品种的多酚含量及抗氧化活性,以冷冻丙酮和Na OH-乙酸乙酯分别提取番薯皮及番薯肉中游离态酚和结合态酚,并采用Folin-Ciocalteu比色法,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法分别测定提取物中多酚和黄酮的含量,以氧自由基吸收能力(ORAC)指征其抗氧化活性。发现番薯皮中总多酚、总黄酮含量及ORAC值均高于相应品种的番薯肉;而在不同品种中,以紫皮紫心番薯中皮、肉中总酚含量最高,分别为(336.87±2.83)×10~(-2)和(121.79±1.68)×10~(-2)mg GAE/g;紫皮紫心番薯皮ORAC值为(6917.79±672.70)×10~(-2)μmol TE/g,高于其他品种,但不同品种薯肉ORAC值无显著性差异。探究了不同加热条件对紫皮紫心薯肉中多酚、黄酮和ORAC值的影响,与未经加热的生薯肉相比,100℃下加热30 min能使其提取物中多酚、黄酮和ORAC值分别提高2倍、2.6倍及5.7倍,表明热加工有利于提高番薯中多酚类物质的释放,提高其抗氧化活性。