乳源性多肽体外模拟胃肠消化实验及其对淋巴细胞增殖的影响

用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法筛选乳源性多肽,进一步采用体外模拟胃肠道消化的方法,检测经过胃蛋白酶和胰酶酶解后的合成多肽对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响,并采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(U-PLC-Q-TOF-MS)分析模拟消化后的产物。结果表明,QEVPL具有较好的刺激淋巴细胞增殖能力,经体外模拟消化,终产物促进淋巴细胞增殖的能力下降至原来的93.71%,但没有显著差异。质谱分析结果显示,QEPVL体外模拟消化的终产物为QEPV。进一步的验证实验表明,消化产物QEPV的刺激指数为1.1466,仍具有促进淋巴细胞增殖能力。     

响应面法优化植物乳杆菌lp15-2-1产共轭亚油酸发酵条件

对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)lp15-2-1 转化亚油酸生成共轭亚油酸(CLA)发酵工艺进行研究。通过单因素试验确定最佳接种量、培养温度、初始pH 值、培养时间、亚油酸添加时间、亚油酸质量浓度。采用响应面Box-Benhnken 试验设计,建立初始pH 值、培养温度和亚油酸质量浓度的二次多项式回归方程模型,所得植物乳杆菌发酵产共轭亚油酸的最佳参数为：温度30℃、亚油酸质量浓度0.21mg/mL、初始pH6.3,此条件下,CLA得率为44.77μg/mL,CLA 理论得率为45.326μg/mL,转化率为21.32%,与优化前转化率7.78% 相比,有了很大提高。     

产共轭亚油酸植物乳杆菌的筛选、鉴定与诱变

从传统泡菜中筛选得到1 株乳酸菌lp15 能够合成共轭亚油酸(CLA),经16S rRNA 全序列分析法和API 系统鉴定法鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。利用人工诱变方法,以lp15 为出发菌株,采用紫外线、硫酸二乙酯(DES)依次诱变处理,经进一步液体发酵复筛获得多株突变菌株,CLA合成能力较出发菌株提高了29.3%～52.2%。其中lp15-2-1 突变菌株为CLA 生成能力最高菌株,MRS 培养液中添加0.2mg/mL LA 培养48h,CLA 产量达30.13μg/mL。经气相色谱(GC)检测分析,产物中cis9, trans11- 共轭亚油酸(c9, t11-CLA)占76.5%,trans10, cis12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)占23.5%。