岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物对 D-半乳糖氧化损伤小鼠的抗氧化作用

本文利用岩藻聚糖硫酸酯降解酶（EQFF）对大分子量岩藻聚糖硫酸酯进行降解,进而得到低分子量的酶解产物,比较并分析了酶解前后岩藻聚糖硫酸酯对D-半乳糖氧化损伤小鼠的抗氧化作用。将SPF级昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、岩藻聚糖硫酸酯组、酶解物组、阳性对照组,饲养42 d后处死,测定血清和肝脏组织的抗氧化指标。试验结果表明,岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物与模型组相比都具有显著的抗氧化活性。岩藻聚糖硫酸酯酶解物组小鼠抑制血清和肝脏组织的？OH的活性达到500.67±35.67 U/mL和1821.34±162.02 U/mgprot,T-SOD活力达到101.82±3.98 U/mL和3053.36±245.88 U/mgprot;同时,岩藻聚糖硫酸酯酶解物组小鼠的血清CAT活力达到4.05±0.56 U/mL,GSH-Px活力达到348.88±29.22 U,说明低分子量的酶解产物比高分子量的岩藻聚糖硫酸酯有更显著的抗氧化作用,为岩藻聚糖硫酸酯的应用提供了依据。     

典型牛皮中氨基多糖含量与分布及其在制革过程中的变化

研究了典型牛皮中氨基多糖（GAG）含量及其在制革准备工段中随处理工序的变化。结果表明,黄牛皮和奶牛皮表皮层和粒面层中GAG含量高于网状层和肉面层,奶牛皮中的糖含量高于黄牛皮;在纵切面上,多糖含量沿表皮至肉面逐渐递减,在距离粒面约0.4 mm处GAG含量最高;PAS-AB特异性染色分析发现,在牛皮的表皮层和粒面层的基底膜、毛囊和腺体中含有较多的GAG,胶原纤维表面也观察到氨基多糖的分布。在制革准备工段中,皮内氨基多糖含量随处理工序的进行呈递减趋势,GAG的主要去除工序是浸灰和酶软化,常规制革准备工段中其去除率约为72%。皮中的GAG的去除与脱毛和纤维分散的效果紧密相关,需要进一步研究基于糖苷酶作用的安全、高效的GAG去除方法。     

皮胶原纤维的钙盐矿化对其耐酶解性能的影响及其在酶脱毛中的应用

研究了磷酸钙盐(Ca-P)矿化对胶原纤维耐酶解性能的影响及其在酶脱毛中对皮粒面的保护作用.结果 表明:磷酸钙盐包覆矿化可以在胶原纤维表面形成微米级的不溶性钙盐保护层,提高了胶原纤维的耐湿热性能和耐酶性能,为酶脱毛中皮粒面的保护提供了一种有效的方法.     

RC-3产硫酸软骨素酶的条件优化及酶的分离纯化

研究了菌株RC-3产硫酸软骨素酶的最适发酵条件及酶的分离纯化,分别优化了碳源种类、碳源浓度、氮源种类、氮源浓度和NaCl浓度等条件,在最适发酵条件下对RC-3进行发酵培养,收集菌体进行细胞破碎制备粗酶液。粗酶液依次经过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换层析与Sephacryl S-1000凝胶过滤层析和高效液相色谱(HPLC)进行逐级分离纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法验证纯化酶活力。结果表明,最优碳源为0.5%的岩藻多糖(Fucoidan)加乳糖、最优氮源为1.0%的牛肉膏、NaCl的最优浓度为0.3%,在上述条件下发酵48h,获得的菌体生物量最高,酶活力较优化前提高3倍,达1066.89 U/mL。粗酶经过QFF离子交换层析和Sephacryl S-1000葡聚糖凝胶纯化后获得相对较纯的酶,该酶经过HPLC检测表明主要有2个峰,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了此二峰均具有酶活力。