巴氏灭活嗜黏蛋白阿克曼氏菌对ox-LDL诱导的HAEC细胞损伤的保护作用及机制初探

目的:本研究以巴氏灭活的嗜黏蛋白阿克曼氏菌（pasteurized Akkermansia muciniphila,PAKK）为研究对象,探究其对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAEC）损伤的保护作用。方法:首先利用MTT法评价PAKK对细胞活性的影响并确定合适的剂量。建立ox-LDL诱导的细胞损伤模型,并通过测定细胞乳酸脱氢酶、活性氧等评价PAKK对细胞损伤的保护作用,最后通过测定抗氧化酶活力以及Nrf2抗氧化通路相关基因及蛋白表达等,探讨PAKK改善HAEC细胞氧化损伤的可能机制。结果:菌数为105和106 CFU/mL的PAKK不影响HAEC细胞的活性;能显著降低ox-LDL诱导HAEC细胞的乳酸脱氢酶释放率;显著降低细胞内的活性氧水平,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活力,以及细胞的总抗氧化能力;显著上调细胞内转录因子核因子-E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、血红素氧合酶-1（hemeoxygenase-1, HO-1）、谷胱甘肽巯基转移酶（glutathione S-transferase,GST）以及NADPH醌氧化还原酶1 （NADPH quinine oxidoreductase-1,NQO1）的mRNA表达量;显著上调Nrf2、HO-1、NQO1蛋白的表达。结论:本研究表明巴氏灭活的嗜黏蛋白阿克曼氏菌可缓解ox-LDL对HAEC细胞造成的损伤,且其保护作用可能是通过调节Nrf2信号通路从而增强抗氧化相关基因表达。本研究为开发基于嗜黏蛋白阿克曼氏菌的可用于预防动脉粥样硬化的益生菌相关产品奠定理论基础。     

丁酸钠对副溶血性弧菌毒性的影响及机制研究

目的 探究丁酸钠对副溶血性弧菌毒性的影响及机制。方法 通过测定丁酸钠对副溶血性弧菌生物膜形成能力及黏附宿主细胞能力, 评估其对副溶血性弧菌毒性的影响; 此外基于傅里叶变换红外光谱法和拉曼光谱法检测胞外成分变化;利用RT-qPCR探究毒力基因转录水平变化。结果 亚致死浓度的丁酸钠基本不影响副溶血性弧菌生长,但对生物膜形成有显著地抑制作用; 丁酸钠处理后,副溶血性弧菌对Caco-2细胞的黏附率分别降低28%、41%和61%; 傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和拉曼光谱表明丁酸钠能影响副溶血性弧菌脂肪酸及蛋白质疏水性以及降低核酸、碳水化合物和蛋白质的峰面积; RT-qPCR分析显示丁酸钠可显著下调与副溶血性弧菌毒力相关基因的转录表达。结论 丁酸钠具有一定的抑制副溶血性弧菌毒性的能力, 有潜力用于预防及控制副溶血性弧菌造成的食源性疾病。     

丁酸钠对副溶血性弧菌的抑制及其作用机制

使用琼脂稀释法测定丁酸钠对副溶血性弧菌的最小抑菌浓度(MIC),利用荧光探针和蛋白质、核酸等内容物泄露情况检测丁酸钠对副溶血性弧菌细胞膜通透性、膜功能和膜电位的影响,通过扫描电镜和荧光显微镜观察丁酸钠对菌体微观形态的影响。结果显示,丁酸钠对副溶血性弧菌的MIC为32 mg/mL;MIC和2MIC的丁酸钠均能破坏细胞膜结构和完整性,使细菌膜电位显示出超极化现象,也造成细菌表面褶皱、变形和干瘪等现象,均呈剂量依赖性。结果表明,丁酸钠可通过改变菌体的形态和膜通透性来发挥其抑制副溶血性弧菌的效应。