鲍鱼肽的制备及其抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖作用

将鲍鱼内脏进行蛋白酶解、超滤和纳滤制备鲍鱼肽,研究不同质量浓度鲍鱼肽对体外培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。结果表明：鲍鱼肽中除含有71.62%（质量分数,下同）蛋白以外,还含有3.38%碳水化合物和11.48%灰分;鲍鱼肽的分子质量主要分布在350～1 000 Da,丰度较高的蛋白肽分子质量分布在350 Da 附近,表明鲍鱼肽中由2～3 个氨基酸组成的寡肽占比较高。根据四甲基偶氮唑蓝法检测的结果,发现不同质量浓度（1、2、4、8 mg/mL）鲍鱼肽均能抑制MDA-MB-231细胞的生长增殖,并呈现出明显的剂量依赖性。伴随鲍鱼肽质量浓度的增加,贴壁细胞数量逐渐减少,细胞变圆,且部分细胞核出现浓缩。流式细胞术分析结果表明,鲍鱼肽主要将MDA-MB-231细胞阻滞在S期和G2期,诱导MDA-MB-231细胞凋亡和坏死,进而抑制肿瘤细胞增殖。因此,利用鲍鱼内脏制备的蛋白肽是一种具有发展潜力的辅助抗肿瘤功能性食品。     

鲍鱼肌肉多糖的性质及抗肿瘤活性

利用蛋白酶酶解结合乙醇分级沉淀的方法从皱纹盘鲍肌肉中提取鲍鱼肌肉多糖（abalone muscle polysaccharide,AMP）,通过DEAE-52柱层析分离后得到了AMP-1、AMP-2、AMP-3三个组分,并考察各组分的理化性质和抗肿瘤活性。化学组成的测定结果表明,AMP的总糖质量分数达到了83.9%。经DEAE-52柱层析分离后,AMP-1的总糖质量分数为83.8%,高于AMP-2（62.5%）和AMP-3（31.6%）。单糖分析的结果表明,AMP主要由葡萄糖组成,而AMP-1中基本只含有葡萄糖,AMP-2和AMP-3主要由葡萄糖和半乳糖组成,同时含有较多的氨基糖。化学组成、紫外光谱和红外光谱结果表明,AMP-1是一种纯度较高的α-构型的吡喃糖,而AMP-2和AMP-3可能是糖蛋白。碘液染色结果说明AMP-1是一种非淀粉的葡聚糖。扫描电子显微镜结果显示AMP和AMP-1是片状结构,而AMP-2和AMP-3中含有较多的球状颗粒。AMP和AMP-1对MDA-MB-231细胞和HepG2细胞均表现出了良好的抑制活性。     

浸提时间对鲍鱼肌肉沸水浸提物组分的影响

目的:研究沸水浸提时间对鲍鱼肌肉溶出物(BWE)组分的影响。方法:鲍鱼肌肉经过分段沸水浸提,采用SDS-PAGE、PAS染色、HPLC和ICP-OES对鲍鱼肌肉沸水浸提物的成分进行分析。结果:浸提1 min的BWE其蛋白主要分子量为65和220 kDa,而延长浸提时间65 kDa逐渐成为主要蛋白,且PAS染色揭示65 kDa属于糖蛋白。Glu、Asp、Gly和Ala等具有鲜甜味的特征氨基酸是BWE的主要氨基酸,而且精氨酸/赖氨酸的比值随浸提时间延长逐渐增加。单糖分析结果显示,伴随浸提溶出的多糖主要由葡萄糖组成,其摩尔占比从85.30%上升到98.27%。灰分和矿物质元素的测定结果表明,浸提1 min时浸提物中矿物质元素Na和Zn的含量分别为10.29 g/100 g和38.91 mg/100 g。结论:鲍鱼肌肉糖蛋白、呈味氨基酸在沸水浸提中易溶解出来,矿物元素Na和Zn相对其他元素在沸水浸提时更易流失。