牡蛎蛋白酶解多肽降糖及抗氧化活性评价

目的:利用化学方法评价9种酶对牡蛎蛋白酶解所得多肽降血糖和抗氧化活性的影响,筛选最佳酶的种类。方法:以牡蛎蛋白酶解多肽对α-淀粉酶抑制率为指标评价其体外辅助降血糖活性,以DPPH·清除率、超氧阴离子抑制率为指标评价牡蛎蛋白酶解多肽的体外抗氧化活性,筛选出最佳用酶。结果:风味蛋白酶得到的多肽对α-淀粉酶的抑制效果最好,5 mg/mL时抑制率达到67.13%,IC₅₀值为3.806 mg/mL;糜蛋白酶酶解得到的多肽对DPPH·的清除率最高,2 mg/mL时清除率为58.09%,IC₅₀值为1.16 mg/mL;同时,糜蛋白酶酶解得到的多肽对超氧阴离子的抑制率也最高,2 mg/mL时抑制率为53.64%,IC₅₀值为1.75 mg/mL。结论:风味蛋白酶和糜蛋白酶酶解所得牡蛎多肽在降糖和抗氧化方面具有较大的潜力,为进一步开展牡蛎蛋白酶解多肽的研究提供参考。     

生物免疫传感器检测迟缓爱德华氏菌研究

迟缓爱德华氏菌(E.tarda)是最为严重的水产动物致病菌之一,准确、即时的检测手段是预防控制该菌传播的关键所在.通过量子点(QDs)标记E.tarda单克隆抗体(Ab),利用生物免疫传感器技术实现E.tarda的快速、特异性检测.结果显示,QDs-Ab的荧光通过加入氧化石墨烯(GO)产生淬灭,构建了捕获目标细菌的探针,GO最适淬灭浓度为60μg/L.细菌捕获探针中加入E.tarda后,能够检测到重新恢复强度的橙色荧光.针对E.tarda设计的生物免疫传感器的特异性,选取灿烂弧菌、溶藻胶弧菌、副溶血弧菌和嗜水气单胞菌作为对照,结果显示,对照组不能明显引起荧光强度的改变,而实验组却能显著提高荧光强度.本研究建立的基于荧光能量共振转移(FRET)的具有高灵敏度和特异性的生物传感器检测方法在细菌的早期诊断中有良好的应用潜质.     

高速剪切辅助提取浒苔多糖的工艺研究

采用高速剪切辅助提取技术,研究了剪切时间、转速、液料比和剪切次数对浒苔多糖得率的影响,并对不同提取方法进行了比较。在单因素实验的基础上,通过正交实验确定最佳提取工艺条件为液料比50∶1、转速12000r/min、剪切时间80s和剪切次数3次。高速剪切辅助提取工艺简便易行,为浒苔多糖的提取提供一定的理论参考。     

鱼籽多肽降糖及抗氧化活性评价

目的:以鱼籽多肽为原料,测定其氨基酸组成,评价其营养价值并对其抗氧化活性进行初步分析,探讨其是否具有降糖及抗氧化活性。方法:参照文献[1]方法测定鱼籽多肽氨基酸含量;通过高糖诱导RIN-m5f胰岛细胞氧化损伤模型,考察鱼籽多肽对氧化损伤胰岛细胞胰岛素分泌的保护作用;体内实验以正常雄性KM小鼠为实验对象,以阿卡波糖为阳性对照,采取鼠尾尖血测定血糖值的方法进行糖耐量实验。采用紫外分光光度法分析鱼籽多肽对2,2’-偶氮(二异丁基脒二盐酸盐)(AAPH)诱发的红细胞溶血的抗氧化活性。结果:鱼籽多肽中氨基酸含量为70.41%,EAA/TAA为39.23%,EAA/NEAA为64.55%,AAS和CS值较高,第一限制性氨基酸为色氨酸;与损伤组相比,鱼籽多肽100μg/mL显著提升高糖损伤RINm5f胰岛β细胞的胰岛素分泌量至(40.0±6.9)pg/m L;鱼籽多肽500 mg/kg剂量组可显著降低正常小鼠血糖曲线下面积,与对照组比较差异具有统计学意义。鱼籽多肽对红细胞溶血抑制作用的IC50为1 mg/mL。结论:鱼籽多肽中抗氧化活性氨基酸、鲜味氨基酸、药效氨基酸含量丰富,营养价值较高;细胞水平的胰岛素实验筛选到的鱼籽多肽能够改变胰岛细胞胰岛素水平,推测其可能具有降糖活性;动物实验发现其能改善小鼠餐后血糖有效降低血糖曲线下面积,证明其有降糖活性。鱼籽多肽对红细胞溶血的抑制作用阐明其可能通过清除ROS降低细胞氧化应激水平的机制达到降糖效果。     

海地瓜多肽体外降糖活性评价

目的:运用多种体外活性筛选方法评价海地瓜多肽的降糖活性,为海地瓜多肽进一步开发利用提供支持。方法:通过α-淀粉酶抑制剂筛选方法、DPP4抑制剂筛选方法及测定高糖损伤后胰岛细胞分泌胰岛素含量等多种体外降糖评价方法测定了海地瓜多肽的降糖活性。结果:多种体外降糖活性评价结果显示,海地瓜多肽可有效抑制α-淀粉酶活性、DPP4活性,同时可显著提升高糖损伤胰岛β细胞的胰岛素分泌量。结论:海地瓜多肽具有一定的降糖活性,可为后期海地瓜多肽的研发提供一定的理论支持。     

鱼皮低聚肽在大孔吸附树脂上的吸附性能研究

为研究鱼皮低聚肽在大孔吸附树脂上的吸附性能,以鱼皮低聚肽为研究对象,以吸附容量和解吸附容量为评价指标,筛选出ANKX-2为最佳大孔吸附树脂,并利用等温线模型和动力学模型,系统研究了鱼皮低聚肽在ANKX-2上的吸附性能。吸附热力学结果表明,鱼皮低聚肽在ANKX-2上的吸附等温线属于IUPAC的6类等温线中的类型Ⅱ;该吸附过程是可行的、有利的,是多层物理吸附过程,是自发、放热和熵减小的过程。吸附动力学结果表明,鱼皮低聚肽在ANKX-2的吸附过程属于快速吸附类型,准二级动力学模型可较好地拟合试验数据。研究结果可为利用大孔吸附树脂富集鱼皮低聚肽的工艺研究提供技术支持,也为利用大孔吸附树脂制备鱼皮低聚肽的工业化生产提供科学依据。     

鱼籽多肽对小鼠记忆改善的影响

为研究鱼籽多肽对记忆的改善作用,选取144只SPF级雌性KM种小鼠,分为3组,每组48只,将每组小鼠随机分为空白对照组和鱼籽多肽低、中、高剂量组,每日分别给予鱼籽多肽0、0.17、0.33、1.00 g/kg BW剂量灌胃,连续灌胃41 d后,次日进行跳台实验、穿梭箱实验及Morris水迷宫实验.研究结果表明,高剂量组...     

海地瓜多肽体外模拟胃肠消化稳定性

为评价海地瓜多肽的胃肠消化耐受性,建立了体外模拟胃肠消化模型,该模型主要包括模拟人体中胃消化环境和肠消化环境两个阶段。运用α-淀粉酶抑制活性测定方法和ACE抑制活性测定方法测定了海地瓜多肽的胃消化产物和肠消化产物的α-淀粉酶抑制活性及ACE抑制活性。体外海地瓜多肽具有较强的ACE抑制活性及α-淀粉酶抑制活性,胃消化产物与肠消化产物的ACE抑制活性均增强,经胃消化阶段的海地瓜多肽α-淀粉酶抑制活性先下降,待其进入肠消化阶段后,海地瓜多肽的α-淀粉酶抑制活性再次回升,最终被人体吸收的海地瓜多肽发挥了较强的ACE抑制活性和α-淀粉酶抑制活性。海地瓜多肽在体外模拟胃肠消化过程中,其ACE抑制活性及α-淀粉酶抑制活性不会发生剧烈变化,其体外模拟胃肠消化耐受性高,即海地瓜多肽具有较强的ACE抑制活性和α-淀粉酶抑制活性,可开发为功能性食品。     

响应面法优化鱼籽多肽酶解液脱色工艺

采用活性炭对鱼籽多肽酶解液进行脱色,以脱色率和多肽回收率为评价指标,分别考察活性炭用量、时间、温度、p H对脱色效果的影响,在单因素实验的基础上,采用响应面法优化鱼籽多肽酶解液的脱色工艺。结果表明:鱼籽多肽最佳脱色工艺条件为10.5%(m/m)、时间41 min、温度55℃、p H2.8,在此条件下,脱色率77.51%±1.49%、多肽回收率82.26%±2.82%,与理论值差异不显著。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好,多肽回收率高,为鱼籽多肽产品后期研发提供依据。      

不同干燥方式对鱼籽多肽性状和抗氧化活性的影响

研究使用恒温水浴干燥、热风干燥、真空干燥、冷冻干燥、喷雾干燥五种干燥方式获得鱼籽多肽样品,通过比较鱼籽多肽性状和抗氧化活性,研究不同干燥方式对鱼籽多肽性状和抗氧化活性的影响,进而优选出最佳干燥方式。结果显示,冷冻干燥和喷雾干燥所得鱼籽多肽样品颜色最浅,质地最松软,真空干燥次之,热风干燥和水浴干燥所得样品颜色最深,质地最硬;真空干燥所得鱼籽多肽样品清除DPPH·能力最强(IC_(50)=0.17 mg/mL),水浴干燥(IC_(50)=0.25 mg/mL)和热风干燥(IC_(50)=0.18 mg/mL)次之,冷冻干燥(IC_(50)=0.81 mg/mL)和喷雾干燥(IC_(50)=0.83 mg/mL)所得样品清除DPPH·能力最差;各干燥方式所得样品清除超氧阴离子自由基能力无明显区别。通过各指标综合判断,真空干燥方式为鱼籽多肽的最佳干燥方式。