微生物谷氨酰胺转胺酶的研究进展

谷氨酰胺转胺酶(蛋白质-谷氨酸-γ-谷氨酰胺转胺酶EC2．3．2．13,TG)能催化蛋白质分子内或分子间的酰基转移反应,通过形成交联键改善蛋白质的功能性质。其酶活测定方法采用比色法,荧光法、偶联法、放射标记法目前只用于动物TG酶的活性测定;MTG(微生物谷氨酰胺转胺酶)作为胞外酶,从其发酵液中分离纯化MTG主要是用离子交换、凝胶层析、高效液相色谱、超滤等方法;MTG可用于肉食品、大豆蛋白和小麦制品等的加工。     

大蒜素与乳清分离蛋白结合物的体外模拟消化特性

大蒜素，即二烯丙基硫代亚磺酸酯，具有广谱抑菌、抑制肿瘤及抗氧化性等生理活性。大蒜素极不稳定，易降解成各种有机硫化合物，使其活性大大降低。研究显示，大蒜素与乳清分离蛋白形成的二硫键结合物可显著增强大蒜素的稳定性。本文在此基础上对大蒜素提取液及二硫键结合物的体外模拟消化特性进行研究，结果表明，大蒜素与乳清分离蛋白的结合物经模拟胃肠消化后，其含硫化合物组成成分与大蒜素提取液的消化产物相同，说明大蒜素与蛋白结合后不会影响大蒜素活性成分的释放。3-乙烯基-1， 2-二硫环己-4-烯主要在模拟胃消化阶段释放，而二烯丙基二硫醚主要在模拟肠消化过程中释放。与大蒜素结合不会影响乳清分离蛋白在模拟胃肠消化时的水解度。与蛋白相比，结合物消化产物的小分子质量组分含量增加，说明结合物比蛋白更易被吸收利用。     

重组降血压肽IYPR的分离与稳定性研究

研究了大肠杆菌表达的降血压肽IYPR(Ile-Tyr-Pro-Arg)的分离纯化过程,并分析了其活性稳定性。大肠杆菌细胞经过超声提取和亲和层析得到重组蛋白,然后经过肠激酶和胰蛋白酶酶切、凝胶过滤得到肽IYPR,测定了IYPR经过不同的温度、pH和消化道酶处理后的活性变化。结果表明,亲和层析后重组蛋白的纯度达到了约90%,肠激酶酶切重组蛋白后利用透析法将串联多肽IYPR和6×His标签成功分离,串联多肽经过胰蛋白酶酶切和凝胶过滤后得到了单体肽IYPR。IYPR在90℃处理1 h时,其活性为原来的98%,在pH为2～10的水溶液处理5 h时活性保持不变,经过胃蛋白酶消化后,其活性升高了13%。这些特性为重组降血压肽IYPR作为高血压病的防治药物的深入研究提供了参考。     

改性方法对大蒜秸秆总膳食纤维功能特性的影响

为增强大蒜秸秆膳食纤维的生理功能,研究不同改性方法对其总膳食纤维(TDF)的主要功能及微观结构特征的影响。分别利用超声、酶解、水浴及超声辅助酶解法对大蒜秸秆的TDF进行改性和提取,通过吸水性、吸油性、膨胀能力、吸附葡萄糖及胆固醇能力等来评价其功能特性,并用扫描电镜观察其结构变化。结果表明:水浴法得到的TDF得率最高,超声辅助酶解法的TDF得率最低,然而其可溶性膳食纤维含量最高达到12.59%;超声及超声辅助酶解法得到的TDF持水性、持油性及膨胀力均显著优于酶解和水浴法;4种方法中,超声辅助酶解预处理得到的TDF对胆固醇的吸附量最大,为12.46 mg/g;对于葡萄糖吸附能力,超声辅助酶解与超声作用所得TDF的吸附量均较高,且这两种方法之间差异不显著(P0.05);电镜观察TDF的结构发现,超声辅助酶解处理使TDF的微观结构变得更加疏松,其表面呈现蜂窝状,表现出较强的吸附性。研究结果表明超声辅助酶解法为大蒜秸秆膳食纤维主要功能改性的最佳方法。     

超声辅助菜籽毛油脱胶工艺研究

本研究采用水化脱胶、酸法脱胶以及超声辅助水化和酸法脱胶技术对菜籽毛油进行脱胶处理。通过单因素和正交实验考察了柠檬酸添加量、温度、加水量及处理时间对菜籽毛油脱胶效果的影响。结果表明:在柠檬酸添加量0.25%、处理温度60℃、加水量3.5%条件下处理15 min后,再经40 kHz、150 W的超声波处理15 min,菜籽毛油脱胶率可达82.5%,此时脱胶油中的磷含量为19.7 mg/kg。     

超声波对木瓜蛋白酶的活性及动力学和热力学参数的影响

高活性的木瓜蛋白酶有助于降低其在食品和医药工业中的应用成本。研究了超声波对木瓜蛋白酶活性的影响,并从动力学和热力学参数的变化分析了酶活性变化机理。结果表明,超声波对木瓜蛋白酶活性的影响较显著,在超声波功率40 W处理5 min时,木瓜蛋白酶活性提高最大,比对照组提高了9.0%,随着处理时间的延长,木瓜蛋白酶活性开始下降,9 min时酶活性比对照组降低了14.5%。当超声处理温度从20℃增加到40℃时,木瓜蛋白酶的反应速率常数从0.0628增加到0.0753。而热力学参数Ea、.H、.S和.G经过超声波处理后分别降低了14.9%、16.2%、7.3%和0.1%。由动力学和热力学参数的变化可见,木瓜蛋白酶经过一定功率的超声处理一定时间后,其催化的反应更容易进行。     

蒜皮膳食纤维的促溶改性及抗氧化性研究

目的:提高蒜皮膳食纤维的可溶性、评价其抗氧化活性。方法:以蒜皮为原料,采用酶-重量法进行蒜皮膳食纤维(TDF)提取,以及不溶性膳食纤维(IDF)和可溶性膳食纤维(SDF)的分离,对于分离得到的IDF,通过单因素和正交实验,探索纤维素酶酶法改性的最佳工艺条件;对于蒜皮不溶性膳食纤维,通过纤维素酶法改性提高其可溶性。结果:蒜皮中TDF含量为69.18%,其中SDF含量为7.28%、IDF为61.9%;酶法改性的最优条件为:料液比1∶15g/mL、纤维素酶加酶量5%、酶解温度45℃、酶解时间4h、酶解pH6.5,此条件下蒜皮IDF的33.20%转化成为SDF;酶解后溶出的SDF溶液对羟自由基和DPPH自由基清除效果较好。结论:纤维素酶酶解可以显著改善蒜皮膳食纤维的溶解特性,改性后的蒜皮SDF具有较好抗氧化活性。     

重组降血压肽发酵培养基及发酵条件的优化实验研究

以纯化的融合蛋白包涵体表达量为考核指标,对重组降血压肽发酵培养基的组成和发酵条件进行了优化实验研究。以富含疏水性氨基酸的麦胚水解物为基础培养基,通过正交实验,优化得到大肠杆菌BL21-MF3A3制备重组降血压肽的麦胚培养基配方为:酵母粉0.5%、麦胚酶解物C2.0%、葡萄糖0.5%和NaCl0.5%。对发酵过程中的诱导条件进行正交优化实验,得到最佳的诱导条件为诱导温度32℃、诱导起始OD6001.4和诱导时间10h,在此条件下包涵体表达量可达到535mg·L-1。     

重组降血压肽发酵培养基及发酵条件的优化实验研究

以纯化的融合蛋白包涵体表达量为考核指标,对重组降血压肽发酵培养基的组成和发酵条件进行了优化实验研究。以富含疏水性氨基酸的麦胚水解物为基础培养基,通过正交实验,优化得到大肠杆菌BL21-MF3A3制备重组降血压肽的麦胚培养基配方为:酵母粉0.5%、麦胚酶解物C2.0%、葡萄糖0.5%和NaCl0.5%。对发酵过程中的诱导条件进行正交优化实验,得到最佳的诱导条件为诱导温度32℃、诱导起始OD6001.4和诱导时间10h,在此条件下包涵体表达量可达到535mg·L-1。