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目的 克隆幽门螺杆菌粘附素基因hpaA ,构建其原核表达系统并鉴定融合蛋白免疫原性。方法 采用PCR技术从幽门螺杆菌总DNA中扩增hpaA基因 ,T -A克隆后测定核苷酸序列 ,构建pET30a的HpaA表达载体 ,在E .coliBL2 1DE3宿主菌中用IPTG诱导表达 ,Ni2 + 柱纯化后经Westernblot鉴定其免疫原性。结果 所克隆的hpaA基因与报道的相应核苷酸序列同源性为 94 . 8%~ 97. 3% ,氨基酸序列同源性为 94 . 6 %~ 97 .7% ,在 134~ 139位存在一段KRTIQK结构 ,HpaA融合蛋白在pET30a载体中可高效表达 ,经纯化后可获得高纯度的重组蛋白。结论 成功构建HpaA原核表达系统 ,所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性 ,可作为Hp疫苗的候选抗原。 相似文献
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地层水性质研究,对于判断油井出水层位,判断地下地质情况分析油,气藏的保存条件,从而掌握地下水分布和运行的规则,以便有效地寻找合理地开发发油,气田有着重要的意义,本文通过近年来对长度油田地层水的性质特征及形成机的分析,提出了按矿化度和pH值的分类方法,发现低矿高pH值型地水与地层中油,气的存在有着很大的关系,是地层含油,气性的一个很有价值的间接标志。 相似文献
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本文概述了革兰氏阳性菌表面显示技术的基本原理、开发研究的热点载体和菌株及其应用前景 ,并与其它表面显示系统进行比较 ,指出了今后研究开发需要解决的关键问题 相似文献
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结合小型面粉厂短粉路工艺实际情况,改造时不仅强调完善清理设备和辅助设备的作用;还必须兼顾渣磨系统与清粉系统的设置与配合作用,实现联合精选物料,为前路心磨系统最大限度地提供量多质优的纯净胚乳,避免好粉后推,尽量早出粉。 相似文献
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目的 在CHO细胞上表达rhIFN βcDNA。 方法 利用脂质体技术 ,将含hIFN β基因的pRC CMV IFNβ DNA载体和pSV2dhfr DNA质粒按 3∶1的比例转染CHO k1dhfr 细胞 ,后者是选择性标记。筛选在缺乏胸腺嘧啶的选择培养基生长的单个细胞克隆 ,通过MTX加压扩增与dhfr基因共转染IFNβ基因。筛选的细胞株通过大规模培养 ,收集培养液经一系列的步骤纯化。结果 能够耐受 0 .6 μmol LMTX的细胞可产生IFN 10 5unitperday 10 6cells ,CHO细胞中表达的hIFN β纯化后的抗病毒比活性可达 2 .2× 10 8IU mg。结论 建立了适合表达人干扰素 β的CHO细胞株 相似文献