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Klebsiella sp.LSSE-H2的咔唑降解 总被引:1,自引:0,他引:1
从染料污染的土壤中分离出1株新的咔唑降解菌LSSE-H2,能以咔唑作为唯一的碳源、氮源和能源. 依据16S rRNA基因序列的系统发育分析将该菌鉴定为Klebsiella sp. 该菌在30℃、以咔唑为唯一的碳源、氮源的选择性培养基(CNFM)中,经过56 h可将浓度为12 mmol/L的咔唑几乎完全降解,在浓度为16 mmol/L的咔唑中也同样表现出高的咔唑降解活性. 对比分析不同营养成分培养基中对咔唑的降解情况表明,LSSE-H2可能存在独特的咔唑降解活性表达调控模式. 按照已公布的car基因簇序列设计同源引物,PCR扩增出LSSE-H2的包含5个咔唑降解基因的car基因簇片断,测序结果表明,咔唑降解基因高度保守,与Sphingomonas sp. KA1和Sphingomonas sp. GTIN11相应的咔唑基因的同源性都达到100%,只在基因簇的非编码区上发现少数碱基不同. 对比研究表明,LSSE-H2, KA1和GTIN11中car基因簇的起源可能相同,并能在不同的细菌之间水平转移. 相似文献
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采用PCR方法从红球菌Rhodococcus sp. RHA1基因组中克隆了编码甲酸脱氢酶的基因(fdh),将该基因片段插入大肠杆菌-红球菌穿梭质粒pBS306,构建了甲酸脱氢酶表达质粒pBS-PFG,转入专一性脱硫菌R. erythropolis LSSE8-1,得到重组菌LSSE8-1-FDH. 2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色反应测得重组菌LSSE8-1-FDH的总脱氢酶活(OD496)为0.464,原始菌LSSE8-1的总脱氢酶活(OD496)为0.353,重组菌比原始菌酶活增加了31%. 考察了不同浓度甲酸根对R. erythropolis LSSE8-1与重组菌LSSE8-1-FDH生长的影响,当甲酸根浓度为25 mmol/L时重组菌LSSE8-1-FDH的生长最佳. 油水相静息细胞脱硫实验表明,重组LSSE8-1-FDH菌比宿主菌的脱硫速率增加了12.5%,总脱硫率增加了约20%. 相似文献
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利用实验室保存的纳豆激酶生产菌Bacillus subtilis Natto NLSSe进行了g-聚谷氨酸合成研究,在不添加谷氨酸的培养基中合成了分子量在200~300 万Da的g-聚谷氨酸,表明该菌是谷氨酸非依赖型菌. 合成纳豆激酶的合适碳、氮源分别是蔗糖和大豆蛋白胨,合成g-聚谷氨酸的合适碳、氮源分别是柠檬酸和NH4C1. 通过正交实验研究了碳、氮源对纳豆激酶和g-聚谷氨酸联产的影响,结果表明,增加培养基中大豆蛋白胨及柠檬酸的浓度能分别促进纳豆激酶和g-聚谷氨酸的合成,而不抑制另一产物的合成,有利于纳豆激酶和g-聚谷氨酸的联产. 在大豆蛋白胨10 g/L, NH4C1 9 g/L,柠檬酸15 g/L时,纳豆激酶酶活为121.2 U/mL,g-聚谷氨酸产量为1.1 g/L,均达到了单独合成时的水平. 相似文献
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脱硫菌Rhodococcus sp.LY822专一性脱硫活性及相关基因的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以专一性脱硫菌Rhodococcus sp. LY822质粒DNA为模板,利用已知的脱硫基因序列设计引物,PCR扩增得到了3个脱硫基因片段dszA, dszB和dszC. 构建了相应的表达质粒pETA, pETB和pETC,在转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达,得到了dszA, dszB和dszC基因的融合表达产物. SDS-PAGE分析结果显示,蛋白带分子量分别为50, 40和45 kDa. 3种重组菌BL21(DE3)(pETA), BL21(DE3)(pETB)和BL21(DE3)(pETC)的无细胞粗提液(2 mL)的活性检测结果表明,DszC酶的粗提液反应30 min能够将0.02 mmol/L二苯并噻吩完全转化为二苯并噻吩砜,DszA酶的粗提液能够将0.01 mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为羟基联苯亚磺酸盐,DszA和DszB酶的粗提液联合作用能够将0.01 mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为2-羟基联苯,证明LY822对二苯并噻吩的降解符合专一性脱硫的"4S途径". 相似文献
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