淀粉对高山被孢霉产花生四烯酸的影响

研究了淀粉对高山被孢霉产花生四烯酸的影响。采用在发酵培养基中添加淀粉,设置了对照组和实验组,分别绘制其碳氮代谢曲线,并对其菌丝体形态进行观察。结果表明：实验组吸收碳氮的效率要比对照组高,其生物量、含油率和ARA产量各为30．57 g/L,41．16％和4．65 g/L,分别是对照组的1．09倍,1．18倍和1．53倍。据此可初步得出结论：虽然淀粉充当碳源的作用没有葡萄糖明显,但其作为一种固形物起到了附着物的作用,菌丝体依附其上生长的更为分散,不会聚集成团,能够更为高效地吸收周围的营养成分,代谢活动更为旺盛,代谢产物积累的速度和量也就随之增大了。     

响应面法优化寇氏隐甲藻突变株的发酵培养基

对寇氏隐甲藻突变株产DHA的发酵培养基进行响应面优化。首先用Plackett-Burman试验筛选出影响显著的3个因素,再利用最陡爬坡试验和响应面试验对培养基进行优化并建立二次多元回归模型,最后用优化后的发酵培养基在50 L发酵罐上进行放大试验。结果表明在最佳培养基葡萄糖121.41 g/L,谷氨酸钠11.54 g/L,硫酸镁7.25 g/L时,DHA的产量为5.65 g/L发酵液,比优化前提高了10.35%。在50 L发酵罐上发酵培养,DHA产量为9.50 g/L发酵液,为摇瓶培养时的1.68倍。     

寇氏隐甲藻突变株的糖、氮代谢对产油的影响

为了探索在寇氏隐甲藻(crypthecodinium cohnii)突变株的营养生长和油脂积累过程中对碳源和氮源的需求及其影响。通过对照组和5个不同的补糖试验组进行研究,各组经发酵7 d收获,并测定生物量、含油量、DHA含量和DHA产量。结果显示各组在发酵培养24 h时,碳消耗量约为22.5%,氮耗约为50%。随着不同时间的补糖,测定碳耗和氮耗虽有小幅度升降,但在144~168 h时碳耗、氮耗和碳/氮比基本稳定,各组间差异较小。研究表明,前72 h是寇氏隐甲藻生长的重要时期,当碳/氮比在15∶1左右时补糖最佳;当氮源耗尽时补糖不仅可以促进油脂的产生,而且对DHA的形成也是有利的。     

60Co-γ射线辐射诱变寇式隐甲藻6号的技术研究

寇氏隐甲藻是产DHA的优良藻种,期望通过60Co-γ射线诱变提高其DHA的产率,实现商业化生产DHA。寇氏隐甲藻(Crypthecodium cohnii 6号)经不同剂量的60Co-γ射线分别辐照诱变,经分离培养获得了不同诱变剂量下藻体的致死率,并对它们的的生长时间、生长速率以及生物量进行了比较,以确定最佳诱变条件。实验结果表明诱变剂量3.0kGy~5.4kGy时,死亡率达到99.999%以上,诱变剂量为1.8kGy的寇氏隐甲藻经培养后生物量最高,并在开始培养后36h就达到最大生长速率,这为进一步研究提供了科学依据。     

高产花生四烯酸的高山被孢霉突变株的选育

为获得高产花生四烯酸的高山被孢霉突变株,利用~(60)Co-γ射线对实验室保藏的高山被孢霉M12进行辐照诱变育种。在辐照剂量为1、2和3 kGy时,致死率分别为73.6%、80.6%和93.8%。以生物量、含油率和花生四烯酸产量为综合评价指标,经初筛和复筛,选育出了一株M12-2-2突变株。经摇瓶发酵,该突变株的生物量为30.73 g/L,含油率为40.51%,ARA产量为4.75 g/L,其ARA产量比出发株提高了1.65倍。经十代传接培养后,该突变株的遗传性能稳定。     

高山被孢霉的扫描电镜观察

本文对三株高山被孢霉(Mortierella alpina)菌株200012201、88335和87649进行了研究。PDA(potato dextrose agar,马铃薯葡萄糖琼脂培养基)平板观察,200012201菌株的菌落呈波浪状或高山状,菌丝为白色;扫描电镜观察,菌丝发达,分支繁密,很少发现孢囊孢子,但观察到少量的高山被孢霉接合孢子。而88335和87649菌株的PDA平板的菌落平铺于表面,菌丝白色,呈绒毛状;扫描电镜观察,与200012201菌的菌丝相比,菌丝较细,同样分支繁密,容易观察到大量由菌丝梗分化产生的成串的分生孢子。