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凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)是人体凝血和抗凝血平衡的产物,反映人体的凝血状态,其检测结果可用于血栓性疾病的辅助诊断。该研究建立了人血浆样本中 TAT 化学发光免疫分析检测方法,并对其性能进行评估。该研究以 TAT 为免疫原制备杂交瘤抗体,以双抗体夹心模式建立 TAT 化学发光免疫分析检测方法。经过反应优化,磁珠浓度和吖啶酯抗体浓度确定为 0.20 g/L 和 0.2 mg/L,样本量为 50 μL,在 37 ℃ 条件下,磁珠抗体和待测物孵育 5 min,再与吖啶酯标记抗体孵育 5 min。结果表明,该方法与含有凝血酶原(0.20 mg/mL)和抗凝血酶 Ⅲ(0.31 mg/mL)的样本没有交叉反应,且与日本希森美康的 TAT 试剂的检测结果相关性较高(r>0.95)。此外,该方法的各项性能指标良好:空白限 LoB≤0.20 ng/mL,检出限 LoD≤0.40 ng/mL,在 0.40~120 ng/mL 范围内的线性相关系数为 0.998,准确度在 ±8% 的范围内,可满足临床上对血栓性疾病进行辅助诊断的需求。 相似文献
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