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目的真核表达重组人淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte activation gene-3,LAG-3)蛋白胞外段,并进行鉴定。方法用植物血球凝集素(phytohaemagg lutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,流式细胞术检测Jurkat细胞中LAG-3蛋白的表达;提取Jurkat细胞总mRNA,RT-PCR法扩增人LAG-3蛋白胞外段基因片段,同时在蛋白C-末端引入His标签,将其克隆入载体pcDNA3. 1+,构建重组质粒,转染Expi293F真核细胞,当细胞活率低于50%时收获细胞上清,经镍柱亲合层析纯化。纯化产物进行4%~20%SDS-PAGE、HPLC及Western blot分析,BCA法测定浓度。结果经菌液PCR、双酶切及测序鉴定,表明质粒构建正确。重组表达蛋白的相对分子质量约60 000,纯化后纯度达95%以上,与鼠抗LAG-3单克隆抗体可发生特异性结合,浓度为2. 4 mg/mL。结论成功构建了重组真核表达质粒LAG-3/pcDNA3. 1+,并于Expi293F细胞中表达,纯化获得了纯度较高的LAG-3蛋白,为后期LAG-3蛋白的相关研究及其单抗的制... 相似文献
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基于PLC的小型污水处理设备的自动控制系统设计 总被引:2,自引:0,他引:2
主要介绍了三菱公司的FX2N系列PLC在采用膜生物反应器(MBR)工艺的小型污水处理系统中的应用,重点阐述了系统的硬件构成及系统软件的设计思路,具有自动/手动两种工作模式,根据抽吸压力确定反冲洗启动时间,抽吸泵自动定时间歇运行,并整合了超声波清洗以及臭氧消毒技术.指出了PLC设计的关键是达到基本控制功能和要求,实现了对小型污水处理系统的自动化控制. 相似文献
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本文提出使用白光光源位相刀口滤波实现位相物体假彩色观察的方法。理论上推导出白光照明下像平面上光强分布和位相分布的关系。编码时,位相物体和Ronchi光栅紧贴放在输入平面,频谱面上放置位相刀口滤波器,并用单色性良好的滤色片对正、负 相似文献
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主要介绍了三菱公司的FX2N系列PLC在采用膜生物反应器(MBR)工艺的小型污水处理系统中的应用,重点阐述了系统的硬件构成及系统软件的设计思路,具有自动/手动两种工作模式,根据抽吸压力确定反冲洗启动时间,抽吸泵自动定时间歇运行,并整合了超声波清洗以及臭氧消毒技术.指出了PLC设计的关键是达到基本控制功能和要求,实现了对小型污水处理系统的自动化控制. 相似文献
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提出了基干实体模型的工件夹紧点自动确定方法和夹紧信息表示方法。采用了工件外轮廓的规约化方法,根据工件的规约化几何形状,确定工件满足夹紧要求的夹紧点个数,再进行夹紧点位置区域划分。从每个区域中各选择一个夹紧点组成一个夹紧方案,形成了可行夹紧方案集合。根据夹紧点位置、高度与受力多边形关系,来评价夹紧方案。 相似文献
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