酵母常规透射电镜样品制备方法的比较与改进

透射电镜技术中前期样品制备是获得最接近样品真实结构信息的关键。本文选择酵母为观察对象,运用常规样品制备技术,观察不同缓冲液、不同脱水时间和脱水温度对酵母超微结构的影响,优化了酵母常规透射电镜前期制样方案。     

基于显微操作的单细胞分选方法

本文利用激光共聚焦显微镜成像清晰的优势,结合显微操作系统,将视野下看到的目的细胞直接用微吸管挑选出来,实现单细胞分选等功能。由于是在可视条件下进行的分选,细胞分选纯度可达100%。本方法是一种适用于样品量少、样品组成复杂、需要特性表达分选或定位分选的单细胞分选方法。     

对扫描电镜观察微生物样品出现磷酸盐结晶现象的改良

制备常规扫描电镜生物样品时,通常使用磷酸缓冲液来进行漂洗,其结果是容易产生结晶,沉积在样品表面.针对微生物具有坚韧的细胞壁的特性,作者使用去离子水替代磷酸缓冲液来漂洗固定液.结果显示,扫描电镜下样品形态完好,无磷酸盐结晶,提高了样品制备的成功率.     

大肠杆菌长时间观察的方法

细菌个体微小,在液体中运动性强,且有的细菌有鞭毛、菌毛等结构,增加其运动能力,因此对感兴趣的细菌长时间观察很有难度.本文采用激光扫描共聚焦显微镜,比较多聚赖氨酸或低熔点琼脂糖处理后,大肠杆菌长时间观察的效果.结果发现在多聚赖氨酸包被的培养皿上加入含1.5%低熔点琼脂糖的LB培养基、室温培养或者在多聚赖氨酸包被的培养皿上加入含6%低熔点琼脂糖的LB培养基37℃培养,大肠杆菌均可在聚焦面贴壁分裂生长.连续观察2h以上大肠杆菌没有漂离视野,实现了显微镜下清晰呈现大肠杆菌分裂生长过程的目的.