NR2B在硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛中的表达变化所起作用的研究

目的：探讨在硝酸甘油（Nitroglycerin,NTG）诱导大鼠偏头痛中NMDA受体NR2B亚基的作用。方法：通过皮下注射硝酸甘油构建偏头痛大鼠模型,采用RT-PCR、免疫组织化学法检测三叉神经节中NR2B的表达变化。结果：偏头痛大鼠三叉神经节NR2B的mRNA和蛋白表达量较对照组明显升高（P〈0.05）。结论：NR2B通过神经传导可在偏头痛发病中起到重要作用。     

硝酸甘油对体外培养三叉神经节星形胶质细胞的损伤作用

目的：硝酸甘油（glyceryl trinitrate或nitroglycerin,GTN）对于体外培养的三叉神经节星形胶质细胞损伤作用,为偏头痛发病机制研究提供依据。方法：体外纯化培养大鼠三叉神经节星形胶质细胞,采用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光法鉴定。不同浓度的硝酸甘油作用于星形胶质细胞后,应用Alarm blue检测细胞活力,并筛选出可以影响细胞活力的适宜刺激的浓度;适宜刺激后用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,激光共聚焦显微镜测定各组星型胶质细胞内钙离子浓度的变化;RT-PCR检测IL-1β、TNF-αmRNA表达。结果：GFAP免疫荧光法显示培养的星型胶质细胞阳性率达95%左右;0.55mmol/L、1.1mmol/L和2.2mmol/L三种浓度硝酸甘油刺激星型胶质细胞后活力明显降低（P〈0.05）,但从细胞活力和形态上观察0.55mmol/L硝酸甘油刺激最佳;0.55mmol/L硝酸甘油刺激后细胞内钙略降低,IL-1β、TNF-αmRNA表达增高（P〈0.05）。结论：硝酸甘油对于体外培养的星型胶质细胞有明显的损伤作用,其机制可能与炎症因子相关。     

基于生物信息学分析方法设计HSV-1诊断芯片的通用寡核苷酸探针

目的：设计单纯疱疹病毒1型（HSV-1）诊断芯片的寡核苷酸（Oligo）探针;方法：利用BLAST软件对HSV-1的基因序列进行对比,得出对设计HSV-1探针有意义的特异序列,并通过生物学软件Oligo 6.0设计特异性高Tm值相近、长度均一的Oligo探针;结果：获得在相同的杂交、清洗条件下可得到最佳杂交效果的10条30-mer的Oligo探针;结论：通过生物信息学方法设计出HSV-1诊断芯片的探针,可为后期制备成基因芯片,为进行HSV-1的检测打下良好的基础。     

血管性痴呆大鼠行为学及海马CA1区CREB改变的研究

目的：观察缺血性痴呆（VD）大鼠神经行为学及海马CREB的改变,并探讨两者间的关系。方法：采用双侧颈总动脉永久性结扎（2 vessels obstruction,2-VO）法建立血管性痴呆模型,8周后采用Morriss水迷宫实验测试大鼠记忆行为,海马HE染色检测神经元损伤,PCR及免疫组化检测海马CAl区CREB表达的变化。结果：模型组与正常组相比,大鼠认知功和神经元损伤程度明显,海马区CREB表达也明显降低（P〈0.01）。结论：2-VO法成功制作了缺血性痴呆大鼠模型。模型大鼠脑内海马区CREB水平明显下降,其空间学习记忆障碍可能与海马区CREB表达下降有关。