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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量. 相似文献
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1 引言利用电光效应可以制作出多种电光器件,它们在激光,光电子以及一些信息科学技术领域中占有重要地位,其中已得到广泛应用的当数电光调制器和电光偏转器,在这一章里,我们将以电光调制器和电光偏转器为重点讲述电光器件的工作原理以及一些设计上的问题。 相似文献
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啤酒酵母菌种用液体石蜡技术保藏具有设备简单、操作方便,成活率高,变异少,优良种性能保持较长时间的优点,实用价值高。本文从液体石蜡保藏菌种的机理、保藏效果、保藏等具体技术操作及其使用方法都作了较为详细的介绍,相信能为啤酒菌种的保藏带来较大的好处。 相似文献
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已建成的兰州重离子加速器的真空室是一个大型整体结构的超高真空容器,直径约10m,高4.5m,重65000kg,内表面积211m~2,容积100m~3,工作真空度为5×10~(-5)Pa。采用有限单元法在计算机上用SAP-5C程序对真空室受力分析进行了计算。真空室结构材料选用瑞典Uddeholm钢厂生产的316 L 超低碳不锈钢。承制此大型容器的是航天工业部风华机器厂。由于结构庞大,首先将真空室分成八大块和几小块在工厂制造,然后运至现场焊制成一整体容器并进行机械加工。所有密封焊缝均用着色渗透液,X-射线探伤和氦质谱探漏仪进行检查和探漏。 相似文献
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9.
矿山发展问题随着目前形势所迫,已日趋被重视,本文从企业所属矿山现状出发,进行了分析并结合当前的经济形势,提出了相关的对策。 相似文献
10.
在城市化快速发展的地区,雨水资源浪费与地下水超采这一矛盾日益突出。结合国内外在土壤对污染物的净化规律的部分研究成果,探讨了中国城市雨水利用工作中存在的问题以及对策。 相似文献