荧光假单胞菌胞外蛋白酶的纯化及特性研究

采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100 HR凝胶过滤层析方法对从原料乳中分离出一株荧光假单胞菌胞外耐热蛋白酶进行纯化及特性研究。将纯化后的单一蛋白酶进行SDS-PAGE分子质量测定,并考察最适温度、最适pH值、热稳定性、金属离子对其酶活性的影响及对该蛋白酶的氨基酸种类分析。纯化后蛋白酶的分子质量为47kD,经纯化后蛋白酶比活力提高了近61.38倍;最适温度和pH值分别为30℃和7.0;二硫苏糖醇对蛋白酶活性具有一定的抑制作用,Fe2+可以促进蛋白酶活性的提高;该酶具有较强耐热性,原酶液经130℃热处理3min后,残留酶活仍超过原酶液的47.67%;该蛋白酶氨基酸组成中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和谷氨酸(Glu)的含量占明显优势,其中Gly含量最高,物质的量分数高达42%。     

小麦醇溶蛋白沸石分离工艺优化及其组分分析

目的：探究谷朊粉中醇溶蛋白的提取分离方法。方法：以醇溶蛋白凝沉率为评价指标,优化谷朊粉醇溶蛋白的静置凝沉工艺。进一步以优化后的静置凝沉工艺制备的醇溶蛋白为原料,研究碱液处理沸石分离醇溶蛋白组分工艺,重点考察碱液质量分数（20%,50%,80%）、加热时间（30,60,120 min）以及加热温度（30,50,70,90 ℃）对沸石分离醇溶蛋白组分的影响。结果：谷朊粉中醇溶蛋白提取率为24%,4,10,20,30 ℃下静置凝沉40 h后,醇溶蛋白凝沉率分别为16.6%,20.6%,24.0%,18.9%。显微图像表明,开始凝沉时醇溶蛋白中大小球状蛋白均出现（α-、β-、γ-醇溶蛋白）,凝沉10 h后,在4,10 ℃下出现虫状醇溶蛋白（ω-醇溶蛋白）,凝沉20 h后,虫状醇溶蛋白聚集体大量出现。沸石处理温度为50 ℃、KOH质量分数为20%、处理时间为120 min时醇溶蛋白分离量最大,分离量为10.336 g/kg沸石。同组空白试验所分离出的醇溶蛋白为4.730 g/kg沸石,分离最大量相较于空白试验分离量多出5.606 g/kg沸石。根据紫外最大波长分析,醇溶蛋白及其组分的最大紫外吸收波长均在288.4 nm附近。柱层析第1组分主要成分是低分子量醇溶谷蛋白,第2组分主要成分是高低分子醇溶谷蛋白和α-、β-、γ-、ω-醇溶蛋白,第3组分主要成分为低分子量醇溶谷蛋白。结论：温度对醇溶蛋白凝沉速率影响很大,沸石改性可提高所分离醇溶蛋白量,且分离量与KOH溶液质量分数及改性时间密切相关。     

水杨酸处理对仔姜保鲜效果的影响

以仔姜为试材,采用不同浓度的水杨酸(10,15,20mmol/L)对仔姜进行处理,并于低温(11±1)℃贮藏。结果表明,水杨酸处理可以延缓仔姜贮藏期间失重率、色差值、硬度及脆度的降低。同时水杨酸处理可以延缓总酚、总黄酮及姜辣素含量的降低。其中,15mmol/L浓度的水杨酸处理对仔姜的保鲜效果较好。     

糙米绿茶加工工艺及感官质量模糊综合评判

以糙米粉与绿茶粉为原料,应用挤压重组技术开发糙米绿茶。比较茶米的配比及加工工艺条件对糙米绿茶及茶汤中的茶多酚、咖啡碱、游离氨基酸、还原糖的含量以及冲泡过程中茶汤色泽的影响,应用模糊综合评判法优选糙米绿茶配方及加工条件。结果表明:以4∶6的比例将绿茶粉与糙米粉混合经挤压重组造粒,在烘烤温度160℃、烘烤时间15min的条件下制备的糙米绿茶感观评价最佳,糙米绿茶中的茶多酚、咖啡碱、游离氨基酸、还原糖的含量分别为6.91%,1.37%,0.345%,14.92%。茶汤中的茶多酚、咖啡碱、游离氨基酸、还原糖的含量分别为0.90%,0.18%,0.045%,1.94%。     

猕猴桃果酒专用酵母的筛选与鉴定

旨在筛选酿制猕猴桃果酒专用酵母,为猕猴桃酒在生产过程中品质改善提供专用菌种资源。通过菌落形态和18SrDNA进行测序鉴定菌株,确定从猕猴桃表面筛选出的3株酵母菌的种属关系,并比较分析三者的发酵力、酒精和二氧化硫的耐受情况,采用3株酵母酿制猕猴桃酒,经陈酿后测定酒的理化指标、甲醇含量及挥发性风味物质,筛选最理想的菌株。通过分子生物学鉴定,3株菌株被鉴定为季也蒙毕赤酵母,其中菌株Q3的发酵力最强,能够耐受酒精体积分数为16%,可耐受SO_2的质量浓度为300 mg/kg,酿制的猕猴桃酒酒精度可达11.54%Vol,VC含量390.82 mg/L,残糖5.35g/L,甲醇含量87.7 mg/L,检测出挥发性风味物质25种。菌株Q3在发酵力、酒精和二氧化硫耐受方面都优于菌株Q1、Q2,能满足工业需求,且菌株Q3酿制的猕猴桃酒品质优良,甲醇含量低,在猕猴桃酒工业中具有良好的运用前景。     

香乳菇多糖对Hela细胞凋亡及对RAW264.7细胞免疫活性的影响

为研究香乳菇多糖(LC-1)的抗肿瘤和免疫调控活性,将人的宫颈癌Hela细胞和小鼠巨噬细胞RAW264.7体外培养,分别通过CCK-8法、流式细胞术和ELISA技术检测不同浓度LC-1对Hela细胞增殖和凋亡周期的影响,对RAW264.7细胞增殖、吞噬的影响,及对RAW264.7细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响。结果表明:香乳菇多糖对体外培养的Hela细胞有明显的抑制作用,且影响Hela细胞的形态及凋亡周期,当LC-1浓度为10μg/mL时,Sub峰含量可达19.4%;同时,LC-1能调控巨噬细胞的免疫活性,当LC-1浓度为10μg/mL时,巨噬细胞增值率和吞噬活性分别为67.48%和87.09%,亦能促进巨噬细胞从G0/G1期向G2期和S期转化,同时刺激巨噬细胞产生IL-6和TNF-α,且呈现出明显的剂量依赖性,但对NO生成没有明显的促进作用。综上,在体外试验中,香乳菇多糖LC-1能抑制宫颈癌Hela细胞生长,促进RAW264.7细胞增殖和吞噬活性,刺激巨噬细胞产生免疫因子。