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两段杨树叶绿体DNA片段的克隆及叶绿体定点转化载体的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
利用PCR方法,从毛白杨(Populus tomentosa C.)叶绿体基因组中克隆了1.7kb和1.6kb的相邻DNA片段,对其进行序列分析表明,扩增片段分别具有1766个和1601个核苷酸,前者包括3′rps12,rps7基因的编码区及其边界序列,后者包含ndhB基因的第一外显子和内含子。本文还构建了杨树这两个片段的限制酶切图谱,并以这两个相邻片段为同源重组片段,分别将绿色荧光蛋白(GFP)基因和苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白(Bt)基因,及其原核表达框插入其间,构建了杨树叶绿体定点转化载体pPZG和pPZB。这两个特异性载体将定位整合到杨树叶绿体基因组中反向重复区的rps7和ndhB基因的间隔区,并高效表达GFP和Bt基因。迄今为止,本文所报道的内容在国内、外尚属首次。 相似文献
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