黑牛肝菌多糖结构及体外抗肿瘤活性研究

目的研究黑牛肝菌多糖结构及体外抗肿瘤活性。方法采用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱(~1H NMR)初步研究了其结构,在体外运用细胞学技术,以MFC、CT26.WT、S180 3种肿瘤细胞为靶细胞研究了黑牛肝菌多糖(BA-1)对肿瘤细胞增殖的影响。结果 BA-1的多糖特征结构明显,无其他结构,为均一多糖。与空白组相比,BA-1能在一定程度上抑制MFC、CT26.WT和S180细胞增殖。BA-1浓度为15μg/ml时对MFC、CT26.WT和S180细胞增殖抑制效果最为明显,抑制率分别为30.68%,32.68%和38.90%。结论黑牛肝菌多糖有显著体外抗肿瘤活性,值得进一步研究开发。     

电解刺激技术对E.dissolvens生长代谢的研究

以葡萄糖为唯一碳源,研究了10mA电流下,直流电和交流电对细菌E.dissolvens的电解刺激过程.实验结果表明,10mA电流下,交流电与直流电的施加均能够对细胞的生长和代谢产生促进作用,但在相同的电流强度下,直流电的刺激效果显著强于交流电.通过对电极反应产物的分析,表明可能是电解刺激下产生的氢气,过氧化氢等中间产物所致.     

松乳菇多糖刺激免疫细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡的研究

为研究松乳菇多糖(Lactarius deliciosus Gray polysaccharide,LDG-A)对特异性免疫细胞的增殖效应活性及对肿瘤细胞凋亡的影响,在LDG-A作用下检测T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖效应,并观察T淋巴细胞、B淋巴细胞的细胞形态,检测T淋巴细胞、B淋巴细胞在LDG-A的作用下处于细胞周期各个时期的细胞数量及B淋巴细胞分泌抗体的情况,观察LDG-A作用于肺癌细胞A549的凋亡和细胞骨架情况。结果表明:随着LDG-A质量浓度的增加,能够促进T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖,并呈现出一定的剂量依赖关系;同时LDG-A能够减少T淋巴细胞、B淋巴细胞在G0/G~1期的细胞数量百分比,促进细胞进入G~2/M期,具有促进B淋巴细胞分泌抗体免疫球蛋白M、免疫球蛋白D和免疫球蛋白E的作用。在12.5~50.0μg/m L范围内,LDG-A能够诱导肺癌细胞A549凋亡,并呈现出一定的剂量依赖关系;在细胞凋亡时F-肌动蛋白丝断裂,蛋白纤维网络结构被破坏。综上所述,在体外实验中,LDG-A对特异性免疫细胞具有促增殖效应活性,能够促进肿瘤细胞的凋亡。     

枝瑚菌多糖的结构及其免疫调节活性

本研究以枝瑚菌中分离纯化的枝瑚菌多糖(RF-S)为研究对象,运用红外光谱技术研究了其结构;运用细胞学技术,从体外水平,以巨噬细胞和淋巴细胞为靶细胞,研究了RF-S的免疫调节活性。结果表明:RF-S多糖结构明显,无其他结构,为多糖纯品,且其多糖中的单糖是以吡喃糖苷的形式存在。随着RF-S质量浓度的增加,极显著促进巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖(p<0.01),并呈现一定的剂量依赖关系。同时,当RF-S质量浓度为5 μg/mL时,能极显著地促进巨噬细胞吞噬中性红和荧光微球(p<0.01),并能极显著地刺激巨噬细胞分泌IL-2、IL-10、TNF α和释放NO(p<0.01);同时对刺激巨噬细胞分泌IL-6有显著效果(p<0.05)。综上所述,RF-S具有良好的免疫调节活性。     

敲除Ras1基因对裂殖酵母生长及产孢影响

目的:探究Ras1基因对裂殖酵母生长及产孢的影响。方法:培养将野生型与基因敲除的突变株,分析其生长情况;野生型与突变菌株交配,探讨其产孢情况。结果:在25℃及37℃培养条件下,敲除基因后的突变菌株其生长慢于野生型菌株。产孢实验结果表明,野生型100%产生4个孢子,而突变菌株75%产生1个孢子、25%产生2个孢子,且突变菌株的孢子略小于野生型。结论:敲除基因Ras1会影响裂殖酵母的生长和产孢。     

“南薯88”茎叶多糖的分离纯化，结构鉴定及其生物活性的研究

晒干的"南薯88"的茎叶,通过热水浸提,乙醇沉淀,DEAE-cellulose column柱层析分离纯化,得到"南薯88"多糖纯品(N88P-1)。通过红外光谱技术(IR),高效凝胶渗透色谱(HPGPC),高效液相色谱色谱(HPLC)和核磁共振谱(1 H NMR)等对"南薯88"多糖(N88P-1)的进行了结构鉴定;同时,对"南薯88"多糖(N88P-1)的抗氧化及免疫调控作用进行了初探。结果显示,"南薯88"多糖(N88P-1)的分子量为1 4328 D,红外光谱显示,在3 444.81 cm~(-1)出现O-H的特征伸缩振动峰,1 640.20 m~(-1)出现C=O的特征伸缩振动峰,~1H NMR谱显示δ4.93～δ4.86出现异头氢信号,高效液相色谱色谱显示N88P-1的单糖组成为1∶1的半乳糖和甘露糖。活性研究结果显示,一定范围内的N88P-1浓度可以清除ABTS~+自由基,IC_(50)值为0.48 mg/mL。N88P-1在0.25～3 mg/mL的浓度范围内与DPPH~-自由基的清除能力呈正相关,IC_(50)值为0.96 mg/mL。当N88P-1的浓度为3 mg/mL时,对ABTS~+和DPPH~-自由基的清除能力均达到最高值;免疫细胞增殖活性结果显示,N88P-1在20～80 mg/mL的浓度下,对B细胞和T细胞增殖效果为极显著(P0.01);在10～40 mg/mL的浓度下,对巨噬细胞增殖效果为极显著(P0.01),其中,N88P-1在40 mg/mL的浓度下对3种免疫细胞的增殖效果均达到最佳。     

香乳菇多糖对Hela细胞凋亡及对RAW264.7细胞免疫活性的影响

为研究香乳菇多糖(LC-1)的抗肿瘤和免疫调控活性,将人的宫颈癌Hela细胞和小鼠巨噬细胞RAW264.7体外培养,分别通过CCK-8法、流式细胞术和ELISA技术检测不同浓度LC-1对Hela细胞增殖和凋亡周期的影响,对RAW264.7细胞增殖、吞噬的影响,及对RAW264.7细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响。结果表明:香乳菇多糖对体外培养的Hela细胞有明显的抑制作用,且影响Hela细胞的形态及凋亡周期,当LC-1浓度为10μg/mL时,Sub峰含量可达19.4%;同时,LC-1能调控巨噬细胞的免疫活性,当LC-1浓度为10μg/mL时,巨噬细胞增值率和吞噬活性分别为67.48%和87.09%,亦能促进巨噬细胞从G0/G1期向G2期和S期转化,同时刺激巨噬细胞产生IL-6和TNF-α,且呈现出明显的剂量依赖性,但对NO生成没有明显的促进作用。综上,在体外试验中,香乳菇多糖LC-1能抑制宫颈癌Hela细胞生长,促进RAW264.7细胞增殖和吞噬活性,刺激巨噬细胞产生免疫因子。