流式分析技术快速定量检测牛乳中大肠杆菌O157:H7

建立一种基于流式分析技术的快速定量检测牛乳中大肠杆菌O157:H7的方法。用偶联有异硫氰酸荧光素的大肠杆菌O157单克隆抗体对大肠杆菌O157:H7进行特异性标记,通过优化抗体反应条件,建立流式检测方法,然后对磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffer saline,PBS）和人工污染牛乳样品中不同浓度的大肠杆菌O157:H7进行定量检测。本研究建立的流式检测方法的在PBS中的检测范围为2.57×103～1.12×108?CFU/mL,灵敏度达到2.57×103?CFU/mL。将所建立的流式检测方法应用于牛乳样品检测,当人工污染牛乳样品中大肠杆菌O157:H7的浓度在2.31×104～1.48×108?CFU/mL之间时,流式检测方法与平板计数方法检测结果基本一致,方法的灵敏度为2.31×104?CFU/mL,检测时间为35?min。该方法能快速、定量地检测出牛乳样品中的大肠杆菌O157:H7,在食源性致病菌的快速筛查和监控中具有重要的应用价值。     

乳制品中微生物标准物质研究现状与趋势

乳制品中微生物标准物质是发展微生物计量技术,建立微生物检测标准,完善乳及乳制品质量监管体系的重要工具,具有广阔的需求及应用前景。介绍了乳制品中微生物标准物质的主要特性,保持微生物活性的主要制备技术,以及特性量值、标称特性的测量技术;此外,对乳制品中微生物标准物质发展和应用现状进行了综述,并在分析该领域研究面临的主要问题的基础上,对标准物质需求与趋势进行了展望,旨在为后续微生物标准物质研究提供一定的参考与借鉴。     

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢测量方法研究

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢是生物防护和灭菌效果评价的重要指示微生物,其量值准确可以保证评价的有效性和可比性。对枯草芽孢杆菌涂布平板法进行了方法验证和协同实验验证以及不确定度分析。结果显示,当平板上的菌落数在30～300CFU之间时,该方法重复性和再现性均较好,室内重复性相对标准偏差为10.0%,室间相对标准偏差为14.1%。经统计分析,胰蛋白胨大豆琼脂培养基平板涂布法相对扩展不确定度为12.0%(k=2),适用于枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢定量测量,对于人员防护装备防护性能评价、消毒剂检测及灭菌质量控制具有重要意义。     

基于标准物质评价平板计数琼脂培养基的生长率

目的:建立一种平板计数琼脂（plate count agar,PCA）培养基的生长率的评价方法。方法:使用待测PCA培养基对大肠杆菌标准物质进行测定,并根据公式计算大肠杆菌在待测PCA培养基上的生长率。对建立的评价方法的重复性和再现性进行验证。并使用建立的方法对9个品牌PCA培养基的生长率进行评价。结果:所建评价方法的重复性相对标准偏差为9.09%,再现性相对标准偏差为14.42%。不同品牌PCA培养基的生长率存在差异,但都满足0.83≤P_R≤1.17的要求。结论:本研究成功建立了一种基于标准物质的培养基质量评价方法,该方法具有重复性和再现性,可以快速高效评价PCA培养基的生长率。     

基于流式分析技术的奶粉中金黄色葡萄球菌活菌快速定量检测方法研究

建立了一种奶粉中金黄色葡萄球菌活菌快速定量检测新方法.以异硫氰酸荧光素偶联的金黄色葡萄球菌多克隆抗体特异性标记金黄色葡萄球菌,再通过碘化丙啶来区分死活菌,建立流式分析法,并应用于奶粉样品中金黄色葡萄球菌活菌定量检测.结果表明,该流式分析法特异性好;当人工污染奶粉样品中金黄色葡萄球菌浓度在2.72 × 103～2.80 ...     

鸡肉中非典型沙门氏菌标准物质的研制及其在能力验证中的应用

针对目前沙门氏菌标准物质种类缺乏、研制水平有待提高的问题，选取非典型沙门氏菌NIM JZ048作为目标菌，产气肠杆菌CICC 10293作为干扰菌，研制鸡肉中非典型沙门氏菌标准物质。结果表明，该标准物质的沙门氏菌定量标准值为(1.8±0.4)×10³ CFU/g,菌落总数定量标准值为(5.5±0.9)×10³ CFU/g,定性标准值为沙门氏菌阳性。均匀性和稳定性良好，可以在-20℃下稳定保存6个月。此外，将该标准物质作为考核样品用于21家食品承检机构的沙门氏菌定性检测能力验证，其中15家结果合格，其余6家机构因非典型沙门氏菌漏检，结果不合格。制备的鸡肉中非典型沙门氏菌标准物质可以有效用于食品承检机构的沙门氏菌检测能力评价。     

基于平板计数的类球红细菌测量方法研究

类球红细菌是产辅酶Q₁₀的主要微生物之一，定量检测类球红细菌活菌数对优化类球红细菌的发酵条件具有重要意义。通过对接种方式、接种量、培养基种类以及培养温度进行比较研究，对类球红细菌的平板计数法进行优化，并对优化后的平板计数法进行协同实验验证和不确定度分析。平板计数法最终优化结果为：接种方式为涂布法，接种量为50μL,培养基为营养琼脂，培养温度为32℃;该方法重复性和再现性均较好，室内重复性相对标准偏差为6.0%,室间相对标准偏差为16.4%。所优化方法的相对扩展不确定度为9.2%(k=2),适用于类球红细菌定量测量。     

生物安全柜防护性能评价用标准物质研制

生物安全柜的防护性能不仅影响实验结果的准确性和可靠性，而且也关系到实验人员的人身安全，因此其防护性能需要及时评价与校准。枯草芽孢杆菌作为国内外生物安全柜标准中规定的性能评价用指示菌，其芽孢标准物质的研制十分必要。通过将不同浓度的枯草芽孢杆菌芽孢添加到保护剂中，经冻干制备成干粉状标准物质，并研究标准物质的均匀性和稳定性。结果表明制备的枯草芽孢杆菌芽孢计数系列标准物质均匀性良好，在4℃下可以稳定保存24个月，3种不同浓度的标准物质标准值分别为(5.4±1.3)×10⁸ CFU/mL、(5.2±1.3)×10⁶ CFU/mL和(5.3±1.4)×10⁴ CFU/mL,可分别用于生物安全柜人员、产品和交叉污染保护性能评价。