抗SARS刺突蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备抗SARS病毒表面刺突蛋白单克隆抗体,用于SARS研究。方法大肠杆菌中表达的SARS-S2蛋白经纯化后免疫小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,制备单克隆抗体,并进行ELISA和Westernblot鉴定。结果所制备的抗SARS病毒表面刺突蛋白单克隆抗体,能与表达的SARS-S2蛋白发生特异性结合。结论已获得了抗SARS病毒表面刺突蛋白单克隆抗体。     

Bcl-2、C-Raf及双靶点RNAi质粒对HCT-8细胞株增殖的抑制作用

目的研究Bcl-2、C-Raf及双靶点的RNA干扰质粒对人结肠癌HCT-8细胞株增殖的抑制作用。方法利用Ambion公司网上设计软件,分别以Bcl-2和C-Raf为靶标,设计合成63个核苷酸的双链RNA,构建质粒pSilencer3·1-H1/Bcl-2、pSilencer3·1-H1/C-Raf及pSilencer3·1-H1/Bcl-2/C-Raf,分别转染结肠癌细胞株HCT-8,用MTT法检测其对细胞增殖的抑制作用,RT-PCR检测Bcl-2和C-Raf的mRNA转录。结果经MTT法检测,构建的Bcl-2和C-Raf基因及双靶点RNAi质粒3个转染组的细胞存活率均降低,双靶点质粒转染组较两个单靶点转染组细胞存活率明显降低,差异有显著意义。经RT-PCR检测,转染双靶点质粒后,HCT-8细胞中Bcl-2和C-Raf基因的表达均较对照组明显减弱。结论Bcl-2、C-Raf及双靶点RNAi质粒对HCT-8细胞株增殖有抑制作用。     

镁合金表面处理研究现状及发展趋势

近年来,3C产业迅猛发展,节能环保成为全球关注的焦点,而减轻材料的重量和材料的循环利用是实现环保的重要手段.镁合金是最轻的工程金属材料之一,它具有良好的比强度、比刚度、可再循环和良好的铸造性能等特点,具有替代传统材料的广阔前景,被誉为21世纪绿色金属结构材料.但镁合金的耐蚀性差,严重阻碍了它的工业应用.因此,镁合金的表面防护处理极为重要.现在镁合金的表面处理工艺多种多样,良莠不齐.为了探索镁工业表面处理的最佳工艺,按照表面改性和表面涂层两大类系统地阐述了当今国内外镁合金表面处理的各种方法及其优缺点.最后,在综合前述处理工艺的基础上,提出了今后镁合金表面处理工艺的发展趋势.     

国产rhGM-CSFⅡ期临床疗效观察

目的　观察国产rhGM CSF对 5 5例肿瘤患者化疗所致WBE和ANE减少的防治作用及副反应。方法　采用多中心、单盲配对、自身交叉对照的方法。结果　rhGM CSF对肿瘤化疗所致的骨髓抑制、白细胞及粒细胞降低均有治疗及预防作用 ,副反应轻微 ,患者均可耐受。结论　rhGM CSF是肿瘤患者化疗后的一种有价值的辅助治疗药物     

超轻Mg-Li-Zn系变形镁合金冷轧及热处理后的显微组织和性能

研究了超轻变形镁合金Mg-5%~22%Li-2%Zn的冷轧性能、热处理特性以及机械性能. 合金的密度为1.209~1.617 g/cm3. 在室温条件下b相合金(16%和22%Li)具有非常良好的延展性，压下极限可达到90%以上. 研究了Mg-Li-Zn系变形镁合金铸锭经不同温度、不同时间均匀化退火后的组织性能. 对均匀化后的合金锭进行了冷轧，轧后板材在不同温度下进行退火，研究了其再结晶行为及组织性能. 结果表明，Mg-9%Li-2%Zn-2%Ca合金在573 K温度下均匀化退火12 h后合金铸锭组织均匀，有利于冷轧开坯变形；而Mg-9%Li-2%Zn合金523 K温度下均匀化退火24 h后组织较好. 冷轧合金板材在573 K温度退火1 h可发生完全再结晶，生成细小均匀的等轴晶组织.     

应用分光光度法测定胃蛋白酶活力

胃蛋白酶活力测定以往一直沿用“蛋清法”。由于此法测定条件不稳定，操作过程复杂，致使测定结果波动较大。为了改进此方法，并与国际上习用活力单位一致，本实验参照CP90（中国药典90版）胃蛋白酶活力测定方法，建立了分光光度法，并以分光法与蛋清法比较，建立了良好的线性关系。分光光度计为日本岛津UV－2201，胃蛋白酶为国产及德国进口粉剂，牛血红蛋白为美国Sigma公司产品。对照品（酪氨酸）、样品（胃蛋白酶）、底物（牛血红蛋白）溶液均按CP90方法配制。对照液浓度为500ng／Ynl，样品稀释倍数为40000，底物浓度为l％。分别取对…     

乙型肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达

目的提高乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在人参愈伤组织细胞中的表达。方法构建一种植物细胞表达载体pBIBeo,该载体携带CaMV 35S双增强启动子和TMV(U1株)翻译增强子。用pBIBeo转化的农杆菌LBA4404与人参愈伤组织细胞共培养,经G418筛选获得新生抗性细胞团PBIBeo,连续继代培养选育出用于植物源口服乙肝疫苗生产的高产细胞株。提取基因组DNA和mRNA,进行PCR和RT-PCR鉴定,Western blot鉴定HBsAg的特异性,电镜下观察纯化抗原颗粒大小,并以ELISA检测HBsAg的表达水平。结果转化的人参细胞基因组DNA进行PCR反应,得到约700 bp的启动子基因片段。提取mRNA进行RT-PCR反应,得到约700 bp的HBsAg基因片段。Western blot分析可见相对分子质量为24 000的特异性条带。亲和层析纯化细胞表达的HBsAg抗原,电镜观察可见平均直径为32 nm的颗粒。ELISA检测结果表明pBIBeo转化细胞株HBsAg表达量比pBIBSa转化细胞株提高1~2倍。结论人参细胞基因组已经整合了目的基因并稳定高效表达。     

SARS病毒核衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化

目的在大肠杆菌中高效表达SARS核衣壳蛋白。方法将已合成的SARS-CoV N蛋白基因片段,克隆至pUC-18载体,与pET28质粒连接,转化大肠杆菌,进行SARS-CoV核衣壳融合蛋白表达。用SARS患者恢复期血清进行表达产物鉴定。用色谱方法进行表达产物的层析纯化。结果SARS病毒N基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量占总蛋白的30%以上;经三步纯化后纯度达90%以上。结论已获得了SARS核衣壳蛋白样品。     

转基因人参细胞中HBsAg的表达及稳定性研究

目的对转基因人参CS83细胞系表达HBsAg的特异性、稳定性及表达效率进行分析。方法提取CS83细胞表达蛋白,分别以Lowry法和ELISA法检测总蛋白含量和HBsAg含量,SDS-PAGE和Western blot分析表达蛋白的HBsAg特异性。采用冷冻干燥、干燥和低温处理方法检测CS83细胞中HBsAg的稳定性。结果CS83细胞表达产物中总蛋白含量为2·024mg/g,HBsAg含量为504ng/g,占总蛋白含量的0·025%。表达的目的蛋白相对分子质量约为25000,具有HBsAg特异性。经不同方法处理后的保存结果表明,冻干保存稳定性最好。结论所建立的CS83细胞系能够稳定地表达特异性HBsAg。     

超轻Mg-Li-Al系变形镁合金冷轧及热处理后的组织和性能

研究了超轻变形镁合金Mg (5% ~ 22%)Li 2%Al冷轧性能,热处理特性以及机械性能。合金的密度为1.206~1.642g/cm3。在室温条件下β相合金(16%和22%(质量分数)Li)具有非常良好的延展性,压下极限可达到90%以上。研究了Mg Li Al 系变形镁合金铸锭经不同温度、时间均匀化退火后的组织性能。对均匀化后的合金锭进行了冷轧,轧后板材在不同温度下进行了退火,研究其再结晶行为及组织性能。结果表明, Mg 9Li 2Al 2Ca合金在573K温度均匀化退火12h后合金铸锭组织均匀,有利于冷轧开坯变形;而对于Mg 9Li 2Al 合金, 523K 温度均匀化退火24h后组织较好。冷轧合金板材在573K温度退火1h 可发生完全再结晶,生成细小均匀的等轴晶组织。