大型生物质谱仪MALDI-TOF-MS的维护与管理

大型生物质谱基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALD I-TOF-MS)是现阶段对大分子量生物样品分析的一个重要仪器。它具有速度快和精确度高等特点。广泛用于多肽、蛋白质、碳水化合物、合成多聚物、寡核苷酸以及天然产物等的研究。本文主要介绍BRUKER公司生产的REFLEX III型MALD I-TOF质谱仪特点,总结在实验工作过程中的经验与体会。     

用流式细胞仪研究秋茄叶柄薄壁细胞大小及叶绿素含量与海水盐度的关系

采用快速离析方法和流式细胞仪研究了红树植物秋茄成熟叶柄薄壁细胞的大小和叶绿素含量与海水盐度之间的关系。结果表明 ,海水盐度为 0 .8%～ 2 .0 %时 ,随着盐度的升高 ,叶柄薄壁细胞大小和单位体积叶绿素含量的变化趋势与叶肉细胞一致。海水盐度为 0 .8%～ 1.0 %时 ,随着盐度升高 ,向有利于提高光合作用强度的方向发展 ;海水盐度在 1.0 %～ 2 .0 %之间时 ,随着盐度的升高 ,向加强生理干旱适应性方向发展。海水盐度高于2 .0 %时 ,叶柄薄壁细胞的大小和单位体积薄壁组织叶绿素含量随盐度的变化趋势与叶肉细胞不同 ,原因尚待进一步研究。实验结果表明 ,借助快速离析方法 ,使用流式细胞仪研究器官细胞相关特性是可行的 ,为从形态学角度研究红树植物耐盐机理提供了可能 ,扩大了流式细胞仪的应用领域     

铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa PCC7820生物钟基因的克隆及其蛋白相互作用分析

为了深入研究铜绿微囊藻生物钟调控的分子机制,根据蓝藻钟基因的同源序列设计合成了简并引物,通过PCR和染色体步行的方法获得了铜绿微藻Microcystis aeruginosa PCC7820的生物钟基因簇kaiABC.kaiA基因全长873bp,编码一个由290αα组成,分子量大小为33.3kDa的蛋白;kaiB基因全长315bp,编码分子量大小为11.8kDa的蛋白;kaiC基因全长1563 bp,编码蛋白分子量大小为58.3kDa.Kai蛋白间的相互作用是昼夜节律计时产生的重要过程,利用酵母双杂交系统检测了三种Kai蛋白间的相互作用,结果表明KaiA、KaiB和KaiC蛋白自身及KaiA与KaiC、KaiB与KaiC之间都能发生明显的相互作用,而KaiB和KaiA之间没有检测到相互作用.