用核糖体工程技术二次开发海洋微生物菌株资源的研究

经对无活性的海洋来源放线菌B3054进行链霉素抗性筛选,获得了一株具有抗肿瘤活性的链霉素抗性突变株SY-1.从该突变株的发酵物中分离得到了4个活性化合物,其中1个为新天然产物.对该菌株突变前后的rpsL基因(编码核糖体蛋白S12)进行分析未发现发生突变,提示突变位点可能在核糖体的另外亚基上.实验结果表明,核糖体工程技术可用于无活性菌株资源的二次开发利用.     

毛鱼藤废渣中抗植物病菌及抗肿瘤活性物质

从毛鱼藤废渣中追踪分离生物活性物质.结合抗植物病毒、抗肿瘤活性筛选,采用减压硅胶柱层析和反复SephadexLH-20柱层析法追踪分离毛鱼藤废渣活性化学成分,通过理化常数测定和波谱解析进行结构鉴定.结果表明:自毛鱼藤废渣中追踪获得2种化合物,其中鱼藤酮在10 mg/L对匍萄白腐病菌作用最强,抑制率为61.1%;羟基鱼藤素对大肠癌HCT-8细胞、人肝癌BEL-7402细胞、人卵巢癌A2780细胞有很强的抑制作用.毛鱼藤废渣中具有抗植物病毒、抗肿瘤活性化合物属首次报道.     

自组装海藻酸钠纳米粒的制备及作为鱼藤酮载体的研究

以1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC)为偶联剂,将由N’N-二甲基甲酰胺(DMF)活化的脱氧胆酸接枝到海藻酸钠主链的羧基上,得到疏水改性的双亲性海藻酸钠(DSA),DSA在水相自组装形成纳米颗粒,利用紫外荧光分光光度计、动态激光光散射仪和原子力显微镜对其结构性质进行表征,平均粒径为208.7nm,粒径尺寸比较均一且分布较窄,具有较低的临界聚集浓度(criticalaggregation concentration,CAC),而且随着取代度的不断提高,临界聚集浓度不断降低,并将其作为鱼藤酮载体实验发现载药效果良好。     

用核糖体工程技术开拓海洋微生物药用资源的研究

利用核糖体工程技术对海洋中无活性的放线菌B3054进行诱导,获得了突变菌株B3054／M,其形态、菌丝体颜色都与母体菌株有显著的差异,发酵液经HPLC分析发现,代谢产物有明显的变化,特别是突变株产生了能抑制小鼠乳腺癌tsFT210细胞周期活性的活性代谢产物。这是首次利用核糖体工程技术诱变得到的具有细胞周期抑制活性的海洋放线菌菌株,这一研究结果表明,利用该技术对自然界的无活性微生物进行诱导来拓展微生物药用资源是可行的。