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目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件。方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件。结果最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5 h。蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg.protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/(mg.protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%。结论工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高。 相似文献
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还原法羽毛角蛋白再生材料二级结构的差异解析 总被引:1,自引:0,他引:1
建立一种解析还原法羽毛再生材料中蛋白质二级结构差异的方法。对降解所得不同形式角蛋白再生物进行傅里叶变换红外光谱的测试,通过对其酰胺III带的分析,确定在羽毛的再生过程中所得的两种不同形式的降解物(角蛋白溶液和角蛋白凝胶)的二级结构的差异。实验证明:在角蛋白溶液中,α-螺旋占优势,含量在β-折叠之上;而在角蛋白凝胶物中,β-折叠占优势,说明这种结构的角蛋白分子之间更容易生成氢键等物理交联,在一定的环境条件,促使形成致密的角蛋白交联物。该法快速、有效、稳定和敏感,适用于检测还原法羽毛角蛋白再生材料二级结构。 相似文献
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简要对比了2001版和2017版GB/T 8629《纺织品试验用家庭洗涤和干燥程序》的异同,并结合实际应用进行了简单而必要的评述。 相似文献
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目的 优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件.方法 以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件.结果 最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5h.蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg·protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/ (mg·protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%.结论 工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高. 相似文献
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