放射性同位素污染水的净化及对净化机制的探讨

当放射性物质污染水的比放射性在1×10~(-4)居里/升时,芝麻杆灰、玉米杆灰、红薯藤灰等及土类作净化剂时的二级净化率都在95.2—99.8%之间。用光谱定性方法分析芝麻杆灰和麦杆灰的水浸液得知,其中含有Ca~(2 ),Mg~(2 ),Si~(3 ),Al~(3 )及CO_3~(2-),SO_4~(2-),PO_4~(3-),Cl~-等离子。试验表明,CO_3~(2-),Cl~-等离子的存在有助于提高对放射性~(90)锶的净化效率,Ca~(2 )、PO_4~(3-)等离子的存在则使芝麻杆灰对~(90)锶的净化效率有所下降。     

鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.     

美国转基因大西洋鲑产业化对我国的启示

2015年11月19日,美国食品药品监督管理局(FDA)批准了转全鱼生长激素基因(gh)大西洋鲑为第一种可供食用的转基因动物产品,从而取得世界转基因动物育种研究与产业化的历史性突破。经过了长达20年的严格审核,转gh大西洋鲑才获准产业化,不仅充分说明了对包括转基因鱼在内的创新产业的管理决策尤其需要尊重科学规律和客观事实;而且表明基础研究只是产业创新的因素之一,转基因知识的科学普及与企业的积极参与是推动高新技术发展和创新产业形成不可或缺的重要条件;高屋建瓴地制定我国基因改良农业品种市场准入的条例和操作细则已经刻不容缓。     

Loxp突变体的筛选与应用

Cre／loxp系统已成功应用于多种生物的遗传改造,并成为研究基因功能的有力工具之一。由于野生型loxp之间重组反应的可逆性,Cre／loxp系统在基因激活／灭活、基因打靶、基因精细修饰等方面的应用受到了极大的限制,而loxp突变体的出现解决了这一难题。本文就loxp突变体的筛选与应用作了系统全面的介绍。     

壳聚糖-激素药条埋植技术初探

采用壳聚糖-激素共沉淀方法,制备了新型的壳聚糖-甲基睾酮（chitosan-MT）激素埋植药条。药条埋植于实验鱼8天和15天后分别取血样检测GtH含量和解剖实验鱼观察药条的缓释情况,采用放射免疫检法检测血清GtH含量,结果表明,chitosan-MT埋植8天和15天后雄鱼的血清GtH平均含量分别提高到原来的4．36倍和4．53倍;而雌鱼的GtH含量分别是实验前的2．76倍和2．74倍;但同时期取样的雌、雄对照组鲤鱼血清GtH平均含量没有明显差异。由此可见,制备的chitosan-MT药条能在鲤鱼机体内稳定而缓慢释放,并能通过正反馈途径促进GnRH的释放,从而使血清GtH含量增加。     

转生长激素基因鲤鱼几项血液指标的检测

以F2代转“全鱼”生长激素基因鲤鱼为材料,对其体重、体长和几项血液指标进行了检测。实验显示:转基因鱼体重和体长均极显著地高于对照鱼(P<0.01);转基因鱼每毫升血液中淋巴细胞总数为(25.2±6.7)×106个,对照鱼为(18.2±6.6)×106个,两者差异显著(P=0·015);转基因鱼红细胞压积值和白细胞吞噬百分率都高于对照鱼(P<0·05),但是吞噬指数没有统计学差异;转基因鱼的皮质醇水平为(63·8±16·8)ng/ml,对照鱼为(33·2±9·6)ng/ml,前者明显高于后者(P<0·01)。以上结果表明,转生长激素基因不但加速了鲤鱼的生长,还促进了其血液细胞的增殖和吞噬功能,并直接或间接地引起了血清皮质醇水平的升高。     

四倍体鱼的种质改良研究

β－ａｃｔｉｎ基因启动子驱动的草鱼生长激素基因ｃＤＮＡ－“全鱼”基因ｐＣＡｇｃＧＨｃ用显微注射方法导入四倍体鱼卵,获得了生长快,个体硕壮的转基因四倍体鱼。２４０日龄时,转基因鱼平均体重为３０２．７ｇ,是对照鱼的３．１倍,平均体长是对照的１．３４倍,燕可从部分转基因雄鱼挤出精液,而对照鱼尚无此现象。对１９尾转基因四倍体雄鱼的精液和尾鳍ＤＮＡ做ＰＣＲ检测,外源基因和的阳性率分别为９４．７％和５２．６％     

脊椎动物GnRH肽的分子多态性和功能

促性腺激素释放激素（GnRH）是在调控脊椎动物性腺发育和最后性成熟中起至关重要作用的一个保守神经十肽家族．从mGnRH被证实以来，已经从原索动物和脊椎动物神经组织中发现16种不同形式的GnRH肽．在已研究的脊椎动物中，cGnRH-Ⅱ肽在所有脊椎动物脑组织中存在并完全保守，然而发挥主要功能作用的一般都是在下丘脑和端脑中优势表达的种属特异性GnRH肽．与脑组织中存在多种类型GnRH肽相对应的是，在部分脊椎动物的垂体促性腺激素细胞膜上发现多种亚型的GnRH受体（GnRH—R）．GnRH基因或GnRH-R的缺失或突变将导致生物个体繁殖生理学功能出现异常或病变．根据这一原理，采用反义转基因技术，通过在脑水平控制鱼类性腺发育，已成功获得败育的转基因鲤鱼．采用该方法获得的转基因鱼在生态和遗传方面是安全的，将为转基因鱼的产业化提供一种新的技术保障．     

甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的分泌表达

在西非热带植物Dioscoreophyllum cumminsii中存在着一种由两条多肽构成的甜度极高的蛋白Monellin。本研究根据已知的Monellin晶体衍射分析结果和毕赤酵母(Pichia pastoris)基因偏爱密码子设计并合成了连接两条多肽的重组基因，插入到毕赤酵母分泌表达质粒pGAPZαA中。扩增后，电击穿孔转化毕赤酵母GS115，筛选高产菌株放大培养。以5升罐发酵培养，表达量为150mg／L。经纯化，可以获得大于130mg／L的具有高甜度的活性蛋白。     

基因表达系列分析的研究进展及应用

简要概括了SAGE的基本原理和实验程序，侧重对该技术的程序修改和完善以及该方法最近在筛选候选新基因方面的应用进行综述报道。