复用血液透析器（人工肾）膜表面粘附蛋白的实验研究

以Fresenius F6聚砜膜复用透析器为研究对象,对其膜表面粘附的蛋白进行定量分析研究.用4种不同的化学清洗剂及超声波的方法,对膜表面粘附的蛋白进行清洗,以获得最佳清洗方法;对透析器不同部位膜上的蛋白进行测定,获得不同部位膜上蛋白含量的差异性;用双向电泳的方法检测膜上粘附的蛋白含量及其性质,获得不同种类蛋白与聚砜膜结合的特异性关系.结果显示:使用5次后每克纤维膜表面粘附的蛋白量至少为0.1 mg,且在透析器各部位分布不同;超声波是一种用来清洗膜上残留物质的有效方法;膜表面粘附的蛋白主要是中性或偏酸性的蛋白,中、大分子量的蛋白容易造成膜孔堵塞且不易去除,而小分子量的蛋白较易去除.     

盐酸克伦特罗完全抗原的制备及其鉴定

利用重氮化法将小分子半抗原盐酸克伦特罗(CL)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上制得盐酸克伦特罗完全抗原(CL-BSA).采用紫外分光光度法快速确定了BSA∶CL偶联比为1∶17,并通过SDS-PAGE法验证了CL与BSA偶联;间接ELISA法检测免疫Balh/c小鼠血清.结果显示1∶1000稀释后的血清在中和掉BSA的抗体后呈阳性;最后,通过细胞融合获得了一株能稳定分泌CL-McAb的细胞株4H5,经鉴定为IgG1.说明合成偶联比为1∶17的完全抗原能刺激小鼠产生针对盐酸克伦特罗的单克隆抗体.