CD59活性位点相关性基因突变的构建与表达

构建了野生型和突变型CD59重组质粒,建立了高效真核表达系统,探讨了W40位点的生物学活性。采用基因点突变技术使CD59W40基因位置缺失（突变1,M1）及C39W40K41→W39W40W41（突变2,M2）,重叠延伸PCR（overlap extension PCR）定点诱变扩增突变基因,重组入真核表达质粒pIRES,利用阳离子脂质体（Lipfectamine2000）将重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO）进行表达。酶切鉴定及序列测定证实成功构建了pIRES-MICD59、pIRES—M2CD59和pIRES-WTCD59,突变基因约500bp。G418筛选出了CHO转染细胞的稳定细胞克隆,免疫荧光、ELISA检测筛选MICD59、M2CD59和WTCD59蛋白高表达株,连续传代30代有高表达;补体溶细胞反应显示与野生型CD59相比,突变型M1CD59失去对补体的抑制功能,而M2CD59抗补体活性略增高。证实CD59的W40位点对其功能具有重要作用,封闭此位点可提高补体活性,有望用于肿瘤治疗。     

1BiPAP无创呼吸机治疗COPD合并呼吸衰竭60例疗效分析

目的:探讨面罩无创双水平气道正压通气(BiPAP)在治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床疗效.方法:选择60例COPD患者,随机分成治疗组30例,在常规治疗基础上,加用BiPAP辅助治疗;对照组30例采用常规治疗.分别观察两组患者心率、呼吸频率、动脉血气分析结果及肺功能改善情况;结果:治疗组患者心率、呼吸频率、动脉血气分析及肺功能改善优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:合理选用BiPAP治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭疗效可靠,值得在临床上推广应用.     

不同食物来源乳酸细菌的安全性评价

以分离自市售商品、发酵萝卜和发酵面团的48株乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)为对象,评价其安全性和工业化应用前景。这48株菌中,有41株菌没有检测到腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺的形成;有41株菌没有检测到溶解明胶的活性;有36株菌没有表现出明显溶解羊血的特性;有2株菌(QKL2和7)形成L-乳酸的光学纯度为91%,这2株菌不产生物胺、不溶解明胶且不对羊血产生明显溶解圈。这2株菌对低质量浓度(≤20 mg/L)的红霉素和阿莫西林表现为敏感,QKL7对大肠杆菌和酵母菌的抑制力要高于QKL2,但该菌对葡萄糖的理论利用率低。因此,试验获得了2株食用安全度高的LAB菌株,这2株菌形成的复合菌将是预防食品和饲草腐败的益生菌剂。