花鲈肿瘤坏死因子基因及其在LPS和病毒刺激下表达的研究

采用同源克隆和锚定PCR技术，从花鲈(Lateolabrax Japonicus)中克隆到肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα，TNFα)cDNA的全序列。花鲈TNFα的cDNA全长990bp，3′非编码区域(UTR)为192bp，5′UTR为72bp，开放阅读框(ORF)为723bp，可编码241个氨基酸，分子量大约为26kDa。同源性分析表明该序列与其他鱼类甚至哺乳动物的TNFα基因具有很高的相似性，并含有TNF家族的签名序列(signature)。同时，利用RT—PCR技术，对不同刺激下该基因在鱼体内的表达情况进行了初步研究，发现TNFα基因在未受刺激鱼体的头肾和脾脏中有明显的表达。脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)和虹彩病毒(Iridovirus)都可以诱导TNFα基因高水平的表达，但是在不同组织内的表达存在差异。LPS刺激后表达较强的组织是头肾和睥脏，而病毒感染后TNFα在盱脏中的表达较强。研究结果表明花鲈TNFα基因存在组成型和诱导型两种表达调控机制，在抵御病原感染过程中发挥重要作用。     

“三同”钻进大坝倒垂线观测孔技术

一、前言“三同”钻进大坝倒垂线观测孔(简称倒垂孔,以下同)是来观洲坝体承受水的扬压力和温度变化而发生变形、基础位移设施的基础工程,它可对坝体的变形、基础位移提供可靠的研究资料。目前,倒垂孔被广泛推广运用到大中型水电站,对坝体长期进行观测。就目前钻进倒垂孔而言,大致有两种钻进方法,一种是无岩心钻探,用牙轮钻头钻进;另     

鲮生长激素cDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性

利用RT PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段 ,克隆的mcGH全长 5 6 7bp ,编码由 188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30 mcGH ,转化大肠杆菌M15 (pREP4 ) ,在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高效表达 ,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的 32 13% ,经westernblotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH。表达产物主要以包涵体的形式存在。重组蛋白变性、复性后 ,经Ni chelatingSepharose亲和层析纯化 ,SDS PAGE显示 ,纯化的mcGH纯度约为 94 %。纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼 (Oreochromismossambicus) ,经 4周处理后 ,实验组 1和 2的体长增长率分别比对照组快 9 38%和 9 75 % ,体重增长率分别快 2 3 4 2 %和 6 2 4 8%。经t检验统计分析表明 ,表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用 (P <0 0 5 )。     

交流电焊机节电与遥控装置

交焊机在焊接工作中,空载时间不少,如果在此间隙时间内能关断电源或降低焊机的电源电压,将大大减少功率损耗。此外,在工作中还需经常调节焊接电流,当远离焊机或高空作业时,更感到极不方便。为了解决上述问题,这里介绍一种交流电焊机节电与遥控装置。本装置具有结构简单、体积小、重量轻、成本低、操作安全、工     

近江牡蛎16S rRNA基因片段序列变异分析

采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增了近江牡蛎Crassostrea rivularis(Gould)线粒体DNA16S rRNA基因,获得了大约为500bp的片段。PCR产物纯化后进行序列测定,经Clustal X同源排序,去除引物及部分端部序列,得到了415bp的核苷酸片段。比较并分析了该片段的钦洲湾、长沙湾、镇海湾和珠江口共105个近江牡蛎个体的核苷酸序列多态性,共检测到23个多态性核苷酸突变位点,包括16个转换位点和7个颠换位点,发现了1个核苷酸插入突变位点。4个群体可分为12种单倍型。结果表明：4个群体中广西钦洲湾群体遗传多样性最高,其次为长沙湾、珠江口群体,镇海湾群体最低。     

地衣芽孢杆菌De株的胞外产物对凡纳滨对虾脂肪酶活性影响的体外实验

为探析芽孢杆菌提高水产动物的消化酶活性的作用机制,在体外条件下实验研究了地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)De株的胞外产物(Extracellular products,ECP)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)脂肪酶活性的影响.以半透膜法收集地衣芽孢杆菌De株的胞外产物,以匀浆离心法提取凡纳滨对虾成虾的肝胰腺和肠道消化酶,将胞外产物和对虾消化酶按体积比10:90混合,于体外条件下研究不同温度、pH及胞外产物添加量对样品脂肪酶活性的影响.结果显示,地衣芽孢杆菌胞外产物添加组的脂肪酶活性明显高于对照组(P＜0.05),在其最适的pH8～10下对虾肝胰腺和肠道的脂肪酶活性分别提高了118%和136.5%;而在其最适温度30℃～50℃时样品的脂肪酶活性则比两对照组分别提高了394.2%和195.1%.研究还发现,胞外产物添加组的脂肪酶活性与样品中胞外产物的添加量呈正相关.可见,在体外条件下地衣芽孢杆菌De株的胞外产物对凡纳滨对虾的脂肪酶活性具有促进作用.     

大坝倒垂线孔钻进技术

据国外资料统计,在经济发达国家水能资源利用率都在40％以上,有的已达到80～90％。全世界已建大、中、小电站及水库已达25万座。但大坝失事屡有发生,据1978年瑞士统计,1796年至1949年,共有311座失事,1950年至1961年共有75座失事,1962年至1973年共有114座。一旦垮坝将给下游带来巨大的损失,如法国马尔巴赛坝失事,死亡400多人,直接经济损失6800万美元;意大利瓦依昂拱坝,仅仅10min就冲毁了1座城市、7个乡镇,损失惨重。因此,大坝安全监测日益受到重视。